SARS冠状病毒单克隆抗体制备及在肺尸检标本染色中的应用

摘要：

目的制备抗SARS冠状病毒的单克隆抗体,用于SARS的实验室诊断.方法灭活SARS冠状病毒(PUMC01)全病毒免疫BALB/C小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(NS-1)融合,用酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接免疫荧光法(IFA)及免疫印迹法对所获得的细胞克隆进行筛选和鉴定,并用其中一株(M2)杂交瘤诱生的腹水单克隆抗体对SARS患者尸检肺组织切片进行免疫组织化学染色. 结果共筛选出6株杂交瘤细胞,ELISA及IFA法证实其分泌的单克隆抗体与SARS冠状病毒有特异性反应,与其他常见呼吸道病原体均无交叉反应.免疫双扩散方法鉴定1株杂交瘤细胞(M2)为免疫球蛋白IgG3型,其余5株均为IgG1型.免疫印迹试验显示1株杂交瘤细胞(M2)分泌的抗体与相对分子质量68 000的蛋白有特异性反应;4株杂交瘤细胞分泌的抗体与相对分子质量27 000的蛋白有特异性反应,1株在免疫印迹上未见到结果.SARS患者尸检肺组织病理切片免疫组织化学染色阳性,在肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞及巨噬细胞的胞浆均可见阳性颗粒.结论我们制备的6株单克隆抗体是抗SARS冠状病毒的特异性单克隆抗体,用于SARS尸检肺组织免疫组化染色,结果阳性.

关键词：抗体、单克隆、核壳蛋白质类、冠状病毒科

分类号：R4(临床医学)

在线出版日期：2005-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1810-1813