复合杂合性CCN6基因突变致晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病的关节软骨病理和分子病因研究

摘要：

目的观察晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病(SEDT-PA)患者的X线及磁共振成像特点、关节软骨病理特点, 筛查CCN6基因突变位点,探讨SEDT-PA的发病机制.方法应用放射学、磁共振成像方法分析汉族家系中两例SEDT-PA患者骨骼及软骨等结构特点;应用HE和甲苯胺蓝染色法对关节软骨进行组织病理学特点观察;用电子显微镜观察关节软骨组织和细胞的超微结构;设计引物对CCN6基因外显子进行扩增和测序分析;应用突变CCN6蛋白质三维结构预测等方法研究SEDT-PA的发病机制.结果病理检查发现汉族家系中一例SEDT-PA关节软骨细胞增生活跃伴成熟障碍,而基质胶原纤维大小和密度明显下降.突变筛查提示两患者在CCN6基因8号外显子存在两种突变类型,其中的替换突变(1000T→C,Ser334Pro)来自父方;而缺失突变(840delT)来自母方,导致其编码的氨基酸序列移码突变,在下游31个氨基酸残基后提前出现终止密码子,导致蛋白质被截短43个氨基酸残基.蛋白质三维结构预测结果显示840delT截短突变蛋白质与野生型蛋白质相比,从信号肽至第一个结构域(IGFBP)起始的24个氨基酸残基区域由一个单一环变成两个小的交叉环,而且伴C末端明显缩短,而Ser334Pro蛋白质仅有C末端的延伸方向与野生型蛋白质相反,其余结构无明显改变;家系研究发现还有4个成员携带有1000 T→C突变位点.结论 SEDT-PA患者关节软骨细胞和细胞外基质的结构和功能明显异常.CCN6基因的840delT突变是导致SEDT-PA发病的关键性分子病因,而携带有1000 T→C对该疾病的发生可能起着诱因的作用.

关键词：脊柱疾病、骨疾病、代谢性、突变、磁共振成像、病理学

分类号：R6(外科学)

资助基金：国家科技攻关项目969060505;国家自然科学基金39970347

在线出版日期：2005-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1796-1803