端粒酶反义寡核苷酸抑制及联合顺铂治疗子宫内膜癌的实验研究

摘要：

目的研究端粒酶催化亚基反义寡核苷酸在体内、外对子宫内膜癌增殖的抑制作用,探讨反义抑制端粒酶治疗子宫内膜癌的可行性.方法以端粒酶催化亚单位基因(hTERT)为靶点设计合成硫代反义寡核苷酸(AODN),评价AODN对子宫内膜癌HEC-1A细胞株的抑制作用.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测AODN对细胞增殖能力及细胞生长的影响;用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)、定量端粒酶重复扩增法(TRAP)检测AODN对hTERT基因转录及细胞端粒酶活性.建立子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,在体内观察AODN的作用特征.结果不同浓度的AODN转染细胞后,均不同程度的影响细胞的生长.AODN作用后细胞的端粒酶活性及hTERT mRNA的表达显著降低,且这种抑制作用具有明显的时间和剂量依赖性.低、高剂量AODN两组的对荷瘤鼠肿瘤生长的抑制率分别为34.20 % 和89.21 %,顺铂联合AODN抑瘤率达75.30 %.硫代AODN治疗后端粒酶活性下降87.32%. 结论 hTERT-AODN能够有效地抑制子宫内膜癌细胞生长,且与细胞毒性药物顺铂有很好的协同增效作用,hTERT基因的反义治疗有望成为内膜癌预防和治疗的新型药物.

关键词：子宫内膜肿瘤、端粒、末端转移酶、寡核苷酸类、反义、小鼠、裸、順铂

所属期刊栏目：84

分类号：R73;R77

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA215261

在线出版日期：2004-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1721-1725