外源性指导序列体外转换临床大肠杆菌氯霉素抗性表型的实验研究

摘要：

目的研究外源性指导序列(EGS)体外逆转临床分离大肠杆菌氯霉素抗性的能力.方法构建针对氯霉素(Cm)乙酰转移酶(cat)并含卡那霉素(Km)抗性基因筛选指标的EGS重组质粒以及只含Km抗性基因但不含EGS的对照质粒.采用CaCl2方法将重组质粒导入临床分离的耐Cm大肠杆菌株中.通过质粒抽提、菌落PCR鉴定EGS阳性克隆子,分光光度计A600检测导入EGS质粒后耐Cm菌株在液体培养基中的生长率以及KB法检测在固体培养基中的药物敏感试验,探讨EGS分子逆转耐药菌的逆转效应.结果以pEGFP-C1-EGS cat1+cat2重组质粒对16株临床分离的CmR大肠杆菌供试菌进行转化试验,EGS转化子在含Km的培养基上筛选.其中4株转化菌在Cm 100～200μg/ml的液体培养基中生长受抑;在Cm 100～200μg/ml的固体培养基中药敏试验对Cm敏感;转化菌质粒抽提检测出特异EGS条带;菌落PCR扩增鉴定存在EGS.表明16株供试菌中4株临床分离株获得了耐药菌型的表型转换、耐Cm的大肠杆菌临床分离株恢复了对Cm的敏感性.结论EGS分子具有逆转临床耐药菌为敏感菌的能力.

关键词：药物耐受性、抗性逆转、大肠杆菌、外源性指导序列

所属期刊栏目：84

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金39570846

在线出版日期：2004-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1294-1298