分子佐剂C3d增强人绒毛膜促性腺激素β基因避孕疫苗的免疫效应及转变免疫应答模式的研究

摘要：

目的研究分子佐剂C3d能否增强人绒毛膜促性腺激素(hCG)β DNA疫苗的免疫原性,并转变Th1/Th2型免疫应答模式.方法抽提纯化pcDNA3、pcDNA3-hCGβ、pcDNA3-hCGβ-C3d3、pCMV4-hCGβ-C3d3 4种质粒.将12只6周龄BALB/c雌性小鼠分为12组, A1～3组各6只以pcDNA3免疫,作为空白对照组;B1～3组各6只以pcDNA3 hCGβ免疫,作为阴性对照组;C1～3组各6只以pcDNA3-hCGβ-C3d3免疫,作为实验1组;D1～3组各5只以pCMV4-hCGβ-C3d3免疫,作为实验2组.免疫前1周,于小鼠左后腿肌肉注射0.25%普鲁卡因0.1 ml.1周后,在相同部位分别肌注前述4种质粒,剂量分别为:5 pmol(A1～D1组)、10 pmol(A2～D2组)、20 pmol(A3～D3组).3周后,再次给予相同剂量质粒加强免疫.于第2次免疫后3周,处死小鼠.用ELISA法测定外周血抗hCGβ抗体效价和经hCG抗原体外刺激脾细胞培养上清中Th1型(IL-2、INF-γ、TNF-α)/Th2型(IL-4、IL-10)细胞因子分泌水平.结果 C3d分子佐剂能明显提高抗hCGβ抗体滴度.当免疫剂量为20 pmol时,与B3组比较,C3组抗hCG抗体最大效价达到1∶ 450,提高了9倍.D3组抗hCG抗体最大效价达到1∶ 12 150,提高了243倍.D3组与C3组相比较,抗hCG抗体水平提高了27倍.受试小鼠以5 000 IU hCGβ抗原刺激时,含C3d3的C3组及D3组INF-γ、IL-2表达水平显著低于B3免疫组(P＜0.01);TNF-α表达水平也低于B3组(P＜0.05);而C3组IL-4表达水平明显高于B3组(P＜0.05),D3组IL-10表达水平明显高于B3组(P＜0.01).结论 C3d分子佐剂能够增强hCGβ免疫原性;抑制Th1型细胞因子的分泌,增加Th2型细胞因子的分泌,使hCGβ基因免疫的免疫应答效应由Th1型向Th2型偏转.

关键词：佐剂、疫苗、避孕、绒毛膜促性腺激素、β亚基

所属期刊栏目：83

分类号：R392

资助基金：国家自然科学基金30271235;国家重点实验室基金B2-02-1;上海市自然科学基金00ZB14058;高等学校博士学科点专项科研项目9941;卫生部优秀青年人才科研项目97031

在线出版日期：2004-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1906-1909