原发性肝细胞癌中p33ING1b与p53基因间协同功能的研究

摘要：

目的探讨p33ING1b与p53基因间的协同功能对肝癌细胞生长、阻滞细胞周期、诱导肿瘤细胞凋亡及对p53下游基因p21WAF1/CIP1表达的影响.方法采用脂质体方法将p33ING1b与wtp53基因分别转染入HepG2、PLC/PRF/5和Hep3B 3株内源性p53基因表达状态各不相同的肝癌细胞株,同时设转染反义p33ING1b及反义wtp53质粒实验组和转染空载体对照组,转染48 h后检测各实验组细胞凋亡率及分析细胞周期变化,用Western印迹杂交分析各实验组肝癌细胞中p33ING1b与p53蛋白表达的变化,通过分析受p21WAF1/CIP1启动子调控的荧光素酶报道基因表达的强弱,观察各实验组中p53下游基因p21WAF1/CIP1的活性情况.采用6%乙醇为诱导剂作用于各实验组后,再次观察上述各指标的变化. 结果在表达内源性wtp53基因的HepG2细胞中,转染入p33ING1b基因后,与对照组相比,细胞凋亡率增强(22.53%),细胞周期中停滞于G0/G1期细胞的比例增多(67.45%),下游基因p21WAF1/CIP1启动子的活性(13.08)增强(P<0.01).对于表达突变型p53蛋白的PLC/PRF/5细胞,联合共转染p33ING1b与wtp53实验组的G0/G1期细胞比例(78.16%)及p21WAF1/CIP1启动子活性(12.99)比单转染p33ING1b或wtp53基因实验组高(P<0.01),但细胞凋亡率差异无显著意义(P>0.05).经6%乙醇诱导后,联合共转染p33ING1b与wtp53实验组凋亡率显著上升(42.8%).在内源性wtp53缺失的Hep3B细胞中,联合共转染p33ING1b与wtp53组的细胞凋亡率及G0/G1周期阻滞率与对照组相比差异无显著意义 (P>0.05),但下游p21WAF1/CIP1基因启动子的活性明显激活(10.32)(P<0.01). 结论 p33ING1b与wtp53在调控肝癌细胞生长、诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞和激活下游基因p21WAF1/CIP1过程中发挥协同功能,在化学诱导剂作用下这一功能增强.

关键词：肝肿瘤、基因、p53、脱噬作用、细胞周期

所属期刊栏目：83

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30070344,30070839

在线出版日期：2004-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1795-1800