环氧合酶2反义寡核苷酸对胰腺癌新生血管生成的抑制作用

摘要：

目的研究环氧合酶-2反义寡核苷酸(COX-2 AS-ODN)对胰腺癌新生血管生成的抑制作用,探讨前列腺素E2(PGE2)在胰腺癌新生血管生成中的调节作用.方法设计、合成特异性靶向COX-2 AS-ODN.人胰腺癌PC-3细胞进行体外培养,转染COX-2 AS-ODN后0、12、24、40、和72 h以荧光显微镜观察细胞情况.第二批PC-3细胞用于研究量-效关系,分为5组:对照组、Lipo组(接种Lopofectin脂质体)、C1组(1 μg COX-2 AS-ODN + Lipo/孔)、C2组(2 μg COX-2 AS-ODN + Lipo/孔)、和C3组(3 μg COX-2 AS-ODN + Lipo/孔).第三批PC-3细胞用于研究时-效关系,接种3μg COX-2 AS-ODN + Lipo/孔后观察0、12、24、48、和72 h.用RT-PCR观察COX-2 mRNA的表达.以Western印迹观察分别加入3 μg和9μg COX-2 AS-ODN/瓶后PC-3细胞COX-2 蛋白质的表达.18只鸡胚分3组,其绒毛尿囊(CAM)分别接种PC-3细胞以及Lipo、Lipo + COX-2 AS-ODN、Lipo + COX-2 AS-ODN + 前列腺素E2(PGE2),另6只鸡胚仅接种PC3细胞用作对照.用Leica体视显微镜观察新生血管生成情况.结果 RT-PCR示随转染COX-2 AS-ODN浓度的增加,PC3细胞的COX-2 mRNA表达逐渐下调(直到COX-2 AS-ODN浓度为0.2 μmol/L时).COX-2 AS-ODN的作用于12 h后最强,以后渐弱,48 h后基本消失.Western印迹表明COX-2 AS-ODN转染组的COX-2蛋白质表达受抑制,9 μg COX-2 AS-ODN/瓶组的抑制强于3 μg COX-2 AS-ODN/瓶组.Lipo + COX-2 AS-ODN组鸡胚CAM移植肿瘤中的新生血管生成密度明显低于Lipo组;Lipo + COX-2 AS-ODN + PGE2组的新生血管密度介于以上两组之间.结论 COX-2 AS-ODN显著抑制胰腺癌新生血管的生成.内源性COX-2参与对胰腺癌新生血管生成的调节,PGE2在该过程中起重要的介导作用.

关键词：环氧合酶、寡核苷酸、反义、新生血管、病理性、胰腺肿瘤

所属期刊栏目：83

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：上海市科技发展基金994119016

在线出版日期：2003-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1501-1504