重组腺病毒IκBαM在人肝癌细胞HepG2中的表达及对NF-κB活性的抑制

摘要：

目的检测重组腺病毒IκBαM(AdIκBαM)在肝癌细胞HepG2中的表达及TNF-α诱导下IκBαM变化情况,并观察此超级抑制物对NF-κB活性的抑制作用.方法利用GFP及有限稀释法测定病毒滴度和感染靶细胞的效率,Western 印迹法检测293细胞和HepG2中重组腺病毒介导IκBαM的表达及TNF-α诱导下IκBαM变化情况,EMSA观测感染AdIκBαM前后经TNF-α处理的HepG2细胞核中NF-κB活性水平的变化.结果扩增AdIκBαM的滴度为2×108 pfu/ml,MOI为20;AdIκBαM在HepG2中能稳定高效表达且不因TNF-α的诱导而降解,未感染细胞基础水平的IκBα及转入的AdIκBα对照则随诱导时间延长而呈现先逐渐降低后升高的趋势.EMSA显示,感染AdIκBαM的细胞在处理前后均无NF-κB活化迹象,而未感染及感染AdIκBα的细胞经TNF-α诱导后则有NF-κB过度活化情况.结论 AdIκBαM能高效扩增并有效感染靶细胞HepG2,能在HepG2细胞中稳定高水平表达,且不会被TNF-α诱导而降解,能稳定有效的抑制HepG2细胞中NF-κB的过度活化,上述结果初步表明,通过IκBαM超级抑制物抑制NF-κB的活性,再辅以常规的抗肿瘤治疗,有望成为一种十分有效的肿瘤基因治疗方法.

关键词：腺病毒、人、NF-κB、基因疗法

所属期刊栏目：83

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA217121;国家自然科学基金30070297/C03020303

在线出版日期：2003-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1156-1160