10.3760/j:issn:0376-2491.2003.08.015
主要组织相容性复合物Ⅱ类分子转录激活因子核酶的克隆及其活性
目的探讨主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ类分子转录激活因子 (CⅡTA)核酶抑制MHCⅡ类分子的表达.方法设计并合成针对人类CⅡTA的一组核酶,通过体外制备和活性鉴定,筛选出活性较高的核酶-Rz464.将Rz464克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP,简称为pRz464,并稳定转染Daudi细胞株(pRz464-D),流式细胞术检测经典的MHCⅡ(HLA-DR、-DP、-DQ)类抗原表达,RT-PCR检测CⅡTA mRNA水平. 结果 pRz464-D与无关核酶组比较, HLA-DR、-DP、-DQ抗原表达分别降低了88.4%、83.5%、93.4%;同时CⅡTA的mRNA含量明显减少.结论提示抗CⅡTA锤头状核酶抑制了自身mRNA含量,从而阻止了其调控的MHCⅡ类分子的相应表达.
基因表达调控、酶学、移植免疫学、基因疗法
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R3(基础医学)
上海市科技发展基金0143nm068;上海市科技发展基金00DJ14001-8
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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