10.3760/j:issn:0376-2491.2003.05.018
survivin反义寡核苷酸诱导人肝癌细胞凋亡的相关信号转导途径
目的利用人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,探讨survivin基因诱导肝癌细胞凋亡的相关信号转导途径.方法采用脂质体介导survivin反义寡核苷酸转染人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,采用Western印迹及原位杂交检测细胞内survivin蛋白及mRNA的表达,采用流式细胞仪及TUNEL染色检测细胞凋亡的变化,采用western印迹、免疫沉淀、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及激酶活性检测方法测定细胞内丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)及半胱氨蛋白水解酶3表达及活性的变化,观察p38MAPK与半胱氨蛋白水解酶3活性变化之间的关系.结果脂质体介导转染survivin反义寡核苷酸后,SMMC-7721肝癌细胞内survivin蛋白及mRNA表达可分别被下调84.6%及69.7%,凋亡细胞比率由转染前的0.70%增加至31.15%.转染后细胞内p38MAPK及半胱氨蛋白水解酶3表达无明显变化,但其活性显著升高,其中p38MAPK活性升高发生于半胱氨蛋白水解酶3活性升高之前.结论转染survivin反义寡核苷酸可以有效诱导肝癌细胞发生凋亡,其诱导肝癌细胞凋亡的信号通过顺序激活p38MAPK-半胱氨蛋白水解酶3信号途径传导.
反义寡核苷酸、脱噬作用、信号转导
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R73(肿瘤学)
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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