人内皮抑素基因的克隆与表达及其抑瘤作用的实验研究

摘要：

目的克隆人内皮抑素基因，检测其表达蛋白的生物学活性，应用该蛋白治疗裸鼠皮下人脑胶质瘤。方法从人肝组织提取mRNA，用反转录聚合酶链反应技术克隆人内皮抑素基因，将其重组入pUC19，双脱氧末端终止法测定其核苷酸序列。构建非融合表达载体pDH-endo，使其在DH5α内经温度诱导表达，纯化该表达蛋白并用鸡胚绒毛膜尿囊膜实验和内皮细胞抑制实验检测其活性。经荷瘤裸鼠皮下注射该蛋白治疗人脑胶质瘤。结果成功获得551 bp的人内皮抑素基因，测序正确。该诱导表达蛋白分子量为20 000，具有抑制血管生成活性。该蛋白每天5、10或20 mg/kg裸鼠皮下注射可抑制荷瘤裸鼠皮下人脑胶质瘤血管生成和肿瘤生长（抑瘤率分别为34.5％，76.1％和80.2％）。结论人内皮抑素基因的表达和初步应用，为采用抗血管生成方法治疗脑胶质瘤等实体瘤研究奠定了实验基础。

关键词：内皮抑素、基因、克隆、分子

所属期刊栏目：81

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金39970854

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：783-787