转甲状腺素蛋白对RPE细胞及视网膜微血管内皮细胞生物学行为的影响

摘要：

目的 观察转甲状腺素蛋白(TTR)对视网膜色素上皮细胞(RPEC)增生及视网膜微血管内皮细胞(RMVEC)增生、迁移的影响并考察其与VEGF mRNA表达的关系,方法 通过加入外源性TTR考察TTR对RPEC增生的影响;利用小干扰RNA (siRNA)沉默视网膜色素上皮自身表达的TTR,使用Western blot检测沉默效果;RT-PCR法考察沉默后VEGFmRNA的变化;通过transwell共培养体系,观察TTR沉默前后RMVEC增生、迁移行为的改变.两组间比较行t检验,三组间两两比较用SNK法.结果 MTT比色法显示,4μmol/L组吸光度(A)值(0.36±0.01)低于0μmol/L组A值(0.72±0.02),差异有统计学意义(t=18.08,P＜0.0001),TTR对RPEC的增生有抑制作用;Western blot法检测TTR的表达抑制,实验组与对照组间差异有统计学意义(P＞0.05),TTR的表达被有效沉默;沉默TTR表达后检测VEGF mRNA表达,空白对照组、阴性对照组、实验组3个组间两两比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),TTR的沉默表达并未在mRNA水平上引起VEGF的表达改变;48 h RPEC-RMVEC共培养细胞增生实验结果显示,RMVEC增生数NCsiRNA组”(362.8±17.7)个”和TTR siRNA组”(252.4±13.92)个”间差异有统计学意义(t=4.901,P=0.0012),沉默TTR表达会抑制RMVEC的增生能力.48 hRPEC-RMVEC共培养细胞迁移实验结果显示,RMVEC向外迁移数NCsiRNA组”(229.0±14.9)个”和TTR siRNA组”(147.8±12.2)个”比较,差异有统计学意义(t=4.213,P=0.0029).沉默TTR表达会抑制RMVEC的迁移能力.结论 TTR能抑制RPEC增生、促进RMVEC增生和迁移,这一现象并非通过VEGF实现,其机制值得进一步研究.

关键词：前白蛋白、视网膜色素上皮、视网膜血管、内皮细胞、细胞增殖、细胞运动、血管内皮生长因子A

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资助基金：国家自然科学基金81400415;江苏省自然科学基金BK2012540;National Natural Science Foundation of China81400415;Natural Science Foundation of Jiangsu ProvinceBK2012540

在线出版日期：2016-12-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：856-860