蓝光致人RPE细胞分泌VEGF及PEDF变化及与Ca2+-PKC信号通路的关系

摘要：

目的 探讨蓝光照射致体外培养人RPE细胞分泌VEGF、色素上皮衍生因子(PEDF)、RPE细胞内三磷酸肌醇(IP3)和二酰甘油(DAG)的浓度变化,分析Ca2+-蛋白激酶C(PKC)信号通路之间的相互作用.方法 实验研究.将体外培养的第4代人RPE细胞随机分为6个组,A组:无光照组;B组:蓝光光照组;C组:蓝光光照+PKC激动剂佛波酯(PMA)组;D组:蓝光光照+PKC抑制剂钙磷酸结合蛋白(Calphostin C)组;E组:蓝光光照+硝苯地平组;F组:蓝光光照+钙磷酸结合蛋白组+硝苯地平组.用(2 000±500)lux蓝光照射体外培养人RPE细胞6h,终止培养24 h,采用ELISA测定各组RPE细胞分泌VEGF、PEDF、RPE细胞内IP3和DAG的浓度,采用流式细胞仪检测A、B及F组细胞的凋亡率.结果 A～E组的VEGF浓度分别为(584.38± 10.66)、(700.70±5.88)、(698.21±6.66)、(623.87±3.12)、(648.30±4.91) ng/L.其中B、C、E组的VEGF浓度高于A组,差异有统计学意义(P=O.002,0.002,0.016).A～E组的PEDF浓度分别为(75.96±1.70)、(71.82±1.67)、(72.43±0.58)、(86.31+1.35)、(93.716±1.24) μg/L.其中B、C组PEDF浓度低于A组(P=0.004,0.011).B组和C组的VEGF/PEDF比值显著高于A组(P=0.008,0.027),E组和D组的VEGF/PEDF比值低于B组(P=0.016,0.015).A～E组的IP3浓度分别为(9 108.42±0.74)、(117.23±1.05)、(137.12±2.70)、(139.17±1.39)、(149.60±0.76) μg/L.B、C、D、E组IP3浓度均高于A组(P=0.003,0.007,0.000,0.000),并且C、D、E组IP3浓度均高于B组(P=0.011,0.000,0.000).A～E组的DAG浓度分别为(995.47±13.61)、(1070.10±10.07)、(1046.39±7.90)、(1041.12±9.76)、(1273.13±10.89) pmol/L.B、C、D、E组DAG浓度均高于A组(P=0.000,0.000,0.000,0.000),与B组比较,组DAG的浓度增高(P=0.000),而C、D组DAG浓度降低(P=0.021,0.007).A、B和F组的细胞凋亡率分别是(10.26±1.87)％、(25.06±2.66)％和(19.36±3.23)％.与A组比较,B组和F组的细胞凋亡率升高(P=0.001,0.009);与B组相比较,F组的细胞凋亡率下降(P=0.038).结论 蓝光照射可致人RPE细胞分泌VEGF量增加,PEDF量减少;VEGF与PEDF的比值升高;IP3和DAG浓度增加.L型钙通道及Ca2+-PKC信号通路参与调节蓝光照射导致体外培养的人RPE细胞VEGF、PEDF、IP3和DAG浓度变化,可能存在反馈调节机制.钙磷酸结合蛋白与硝苯地平联合应用可抑制蓝光照射导致体外培养的人RPE细胞凋亡.

关键词：光刺激、视网膜色素上皮、血管内皮生长因子A、眼蛋白质类、神经生长因子类、细胞凋亡

所属期刊栏目：51

分类号：R722.17;R563;R392.32

资助基金：国家自然科学基金;贵州省教育厅重点项目

在线出版日期：2015-12-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：839-843