慢病毒介导miRNA-184体外转染对人晶状体上皮细胞上皮间质转分化的影响

摘要：

目的 观察慢病毒介导miRNA-184体外转染对TGF-β2诱导人LEC发生上皮间质转分化(EMT)时其基因表型的影响.方法 实验研究.构建pL/IRES/GFP-miR-184质粒,经慢病毒介导体外转染由TGF-β2诱导而发生EMT的人LEC,利用QRT-PCR检测转染0、6、24 h后人LEC中相关基因E-钙黏蛋白(CDH1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(VIM)表达水平的变化,并与阴性对照慢病毒侵染组进行比较.采用单因素方差分析进行统计学分析.结果 成功构建pL/IRES/GFP-miR-184质粒,经慢病毒介导转染由TGF-β2诱导而发生EMT的人LEC 24 h后,上皮细胞标志性基因CDH1相对表达量保持相对不变,24 h时为6.30E-06,而对照组则下调,24 h时为1.37E-06,差异有统计学意义(F=261.78,P＜0.01);间质细胞标志性基因α-SMA和VIM的相对表达量均保持相对不变,24 h时分别为1.55E-02和4.61E-04,而对照组则均上调,24 h时分别为2.09E-02和6.73E-04,差异有统计学意义(F=26.21,P=0.007;F=17.91,P=0.013).结论 miRNA-184经慢病毒介导转染人LEC后,能抑制其由TGF-β2诱导所发生的EMT相关的基因表型变化.

关键词：晶体、上皮细胞、上皮-间质转化、微RNAs、转染、慢病毒属

所属期刊栏目：51

分类号：R776.1;R285.5;R3

资助基金：上海市自然科学基金10ZR1414300

在线出版日期：2015-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：295-300