红景天苷对人晶状体上皮细胞氧化损伤保护作用的研究

摘要：

目的 探讨红景天苷对体外培养的人晶状体上皮细胞(HLEC)氧化损伤的影响.方法 实验研究.应用H2O2诱导HLEC建立氧化损伤模型,观察红景天苷对其产生的作用.对数生长期的HLEC分别加入不同浓度(0、10、30、50、100、200 μmol/L)的红景天苷干预24 h后,运用细胞计数试剂盒法检测各组HLEC增殖活力.实验分为5组:空白对照组、H2O2损伤组、红景天苷低剂量组(30 μmol/L红景天苷+H2O2组)、红景天苷中剂量组(50 μmol/L红景大苷+H2O2组)、红景天苷高剂量组(100 μmol/L红景天苷+H2O2组).采用Hoechst33258染色和流式细胞仪检测细胞凋亡;RT-PCR法检测细胞内B细胞淋巴瘤-2相关x蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)及半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)基因的表达.单因素方差分析用于组间均数的多重比较,进一步组间两两比较采用LSD-t检验.结果 细胞计数试剂盒法结果显示,当H2O2的浓度为200 μmol/L时,HLEC的生存抑制率为49.56％±7.07％,接近于细胞生存的半数抑制率(IC50).因此,选择200 μmol/L作为H2O2后续实验浓度.不同浓度红景天甘对细胞活性均无抑制作用,红景天苷(10 μmol/L、30 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L、200 μmol/L)干预细胞24 h后,细胞存活率分别为100.24％±2.07％、101.18％±2.14％、101.32％±2.48％、101.76％±1.93％、99.28％±1.74％,与空白对照组99.84％ ±2.21％相比,差异均无统计学意义(组间比较F=1.044,P=0.415;两两比较P＞0.05).Hoechst 33258染色可见H2O2损伤组有较多HLEC胞核呈致密浓染(凋亡小体),红景天苷干预组HLEC胞核浓染状况明显减轻.流式细胞仪结果显示空白对照组HLEC凋亡率为2.26％±0.29％,H2O2损伤组HLEC凋亡率为44.56％±4.28％,经30、50、100μmol/L红景天苷处理后,HLEC凋亡率分别降为31.52％±3.05％、24.06％±4.25％和17.16％±2.75％,5个组间细胞凋亡率的差异具有统计学意义,且红景天苷浓度越高,HLEC凋亡率越低(F=117.082,P＜0.01,两两比较P值均＜ 0.01).与空白对照组相比,H2O2损伤组Bax和Caspase-3的表达明显增高,Bcl-2的表达明显降低,差异有统计学意义(P值均＜ 0.01).与H2O2损伤组相比,低、中、高剂量红景天苷组Bcl-2基因表达均上调,Bax和Caspase-3基因表达均下调,其中,高剂量组Bcl-2上调及Bax、Caspase-3下调的更为明显.各组之间差异有统计学意义(Bax:F=493.554,P＜0.01; Bcl-2:F=827.820,P＜0.01;Caspase-3:F =537.237,P＜0.01).结论 红景天苷对发生氧化损伤的HLEC具有保护作用,能够抑制HLEC凋亡.

关键词：葡糖苷类、酚类、氧化性应激、晶体、上皮细胞、细胞凋亡

所属期刊栏目：51

分类号：R729.66;R285.5;R975

资助基金：国家自然科学基金81270986

在线出版日期：2015-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：130-135