白藜芦醇对高浓度葡萄糖诱导人晶状体上皮细胞氧化损伤的拮抗作用及其可能机制探讨

摘要：

目的 探讨白藜芦醇对高糖诱导的人晶状体上皮细胞(LEC)氧化损伤的拮抗作用及其可能的机制.方法 实验研究.使用不同浓度(5.5、15.0、25.0、35.0、45.0 mmol/L)葡萄糖培养LEC;25.0 mmol/L葡萄糖培养LEC不同时间(0、6、12、24、48、72 h)并建立(5.0、15.0、25.0、35.0 mg/L)白藜芦醇干预模型.连接素V-碘化丙锭双染色流式细胞法测定检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞中活性氧(ROS)含量,免疫印迹法检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax、iNOS、NF-κB、IκB、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)的表达,试剂盒分析氧化损伤标记物MDA的含量变化.组间差异比较采用单因素方差分析.结果 高糖诱导SRA01/04细胞凋亡表现为浓度和时间的依赖性,随着葡萄糖浓度的升高和作用时间的延长,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低,促凋亡蛋白Bax表达增多.葡萄糖诱导的细胞内ROS和丙二醛(MDA)含量变化也具有明显的浓度和时间依赖性;与5.5 mmol/L组相比,高糖培养ROS产生量显著增加”15.0 mmol/L(F=14.06,P=0.035),25.0 mmol/L(F=17.46,P=0.000),35.0 mmol/L(F=16.58,P=0.001)、45.0 mmol/L(F=12.88,P=0.000)”,差异均有统计学意义;与5.5 mmol/L培养相比,25.0 mmol/L高糖培养6h(F=6.778,P=0.014)、12 h(F =6.551,P=0.001)、24 h(F=7.327,P=0.001),48 h(F=10.84,P =0.000)、72 h(F=13.36,P=0.000)的LEC中ROS产生量显著增加,差异均有统计学意义;与5.5 mmol/L组相比,高糖培养MDA含量显著增加15.0 mmol/L(F=1.177,P=0.035),25.0 mmol/L(F=1.704,P=0.000),35.0 mmol/L(F=2.412,P =0.001)、45.0 mmol/L(F=2.347,P=0.000),差异均有统计学意义;与5.5 mmol/L培养相比,25 mmol/L高糖培养6 h(F=1.704,P=0.014)、12 h(F=5.676,P=0.001)、24 h(F=3.325,P=0.001),48 h(F =6.669,P=0.000)、72 h(F=3.011,P=0.000)的LEC中MDA含量显著增加,差异均有统计学意义.25.0 mmol/L高糖培养中加入5.0、15.0、25.0、35.0 mg/L白藜芦醇后细胞的凋亡减少,促凋亡蛋白Bax表达降低,抗凋亡蛋白Bcl-2表达增多,细胞中的ROS(与基础浓度5.5 mmol/L相比,F值分别为14.76,7.018,13.96,4.733,1.921,P值分别为0.000,0.000,0.003,0.086,0.100)、MDA(与基础浓度5.5 mmol/L相比,F值分别为2.454,1.108,1.630,1.563,2.250,P值分别为0.000,0.001,0.026,0.068,0.183)的表达量均减少;且MnSOD的表达量显著增多,iNOS、NF-κB的活性被抑制.结论 白藜芦醇对高糖刺激LEC氧化损伤具有保护作用,推测其作用机制可能是通过抑制NF-κB的转录活性,从而抑制iNOS介导的细胞氧化损伤.

关键词：二苯乙烯类、抗氧化剂、晶状、上皮细胞、氧化性应激、葡萄糖

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在线出版日期：2014-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：777-783