10.3760/cma.j.issn.0412-4081.2013.11.014
Hsf4-/-小鼠晶状体永生化上皮细胞系建立的研究
目的 建立Hsf4-/-小鼠的晶状体永生化上皮细胞系.方法 实验研究.取新生P6天的Hsf4-/-小鼠晶状体原代培养晶状体上皮细胞(MLEC),用SV40,T-抗原转染,C418筛选建立永生化细胞系MLEC/Hsf4-/-,免疫印迹法检测α-A晶状体蛋白表达.结果 倒置相差显微镜下观察可见细胞贴壁生长,有伪足伸出,多角形,大小均匀,细胞膜边界清晰,细胞质透亮.消化后的细胞呈圆形透亮,胞质丰富.免疫印迹法检测MLEC/Hsf4-/-细胞(两个克隆)中的α-A晶状体蛋白(α-A-crystallin)有表达.转染Hsf4b蛋白后Hsp25蛋白表达上调.结论 采用组织块接种法获得小鼠晶状体上皮细胞后,转染SV40大T-抗原,G418筛选可成功建立永生化细胞系MLEC/Hsf4-/-.
DNA结合蛋白质类、转录因子、晶体、上皮细胞、细胞系、免疫印迹法
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R735.2;R3;R511
国家自然科学基金30871299
2013-12-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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