转化生长因子β2对人晶状体上皮细胞转分化、细胞外基质合成和结缔组织生长因子表达的影响

摘要：

目的 探讨转化生长因子β2(TGF-β2)对体外培养的人晶状体上皮细胞(HLEC)转分化、细胞外基质(ECM)合成及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法 实验研究.采用不同浓度TGF-β2(0.0、0.1、1.0、10.0μg/L)对体外培养的HLEC诱导24 h,倒置显微镜下观察细胞形态的变化；免疫荧光法检测CTGF、间质转分化标志性蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在细胞中的表达时实PCR和Western-blot方法检测CTGF、α-SMA、细胞外基质主要成分Ⅰ型胶原纤维(COL-Ⅰ)和纤维连接蛋白(Fn)的表达.结果 正常HLEC为多角形贴壁细胞,用不同浓度TGF-β2诱导24 h后,细胞由单层多角形变为长梭形,细胞间隙变大,呈纤维细胞样改变.TGF-β2可诱导HLEC表达CTGF,并且随浓度的增加,CTGF蛋白(0.53±0.03、0.73±0.01、0.65±0.03)和mRNA(1.00±0.00、7.18±0.41、12.88±0.45、32.84±1.61)表达均增强,差异有统计学意义(F=77.55,P＜0.05;F=379.0,P＜0.05).TGF-β2能诱导HLEC转分化,浓度依赖性地促进α-SMA蛋白(0.48 ±0.01、0.78 ±0.04、0.69±0.04)和mRNA(1.00 ±0.00、2.30±0.22、3.10±0.21、3.86 ±0.10)的表达,差异有统计学意义(F =62.73,P＜0.05;F=80.22,P＜0.05).不同浓度(0.0、0.1、1.0、10.0 μg/L)TGF-β2从基因和蛋白水平促进HLEC表达COL-Ⅰ和Fn,COL-Ⅰ mRNA的相对值分别为1.00 ±0.00、5.52±0.96、18.31 ±1.20、82.51 ±1.45,Fn mRNA的相对值分别为1.00 ±0.00、2.36±0.25、3.27 ±0.24、4.25±0.24；COL-Ⅰ蛋白表达相对值分别为0.78 ±0.05、1.15±0.11、2.16±0.14,Fn蛋白表达相对值为0.64±0.01、0.95 ±0.02、1.23 ±0.14,其作用呈浓度依赖性(F=1880.52,105.30,P＜0.05;F=64.44,51.81,P＜0.05).结论 TGF-β2可以诱导HLEC表达CTGF,促进HLEC转分化及细胞外基质的合成.

关键词：转化生长因子β2、晶体、上皮细胞、结缔组织生长因子、肌动蛋白类、胶原Ⅰ型、细胞外基质

所属期刊栏目：49

分类号：R695;R575.2;R392.12

资助基金：国家自然科学基金81070721

在线出版日期：2013-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：822-828