膜联蛋白A2在小鼠视网膜新生血管形成过程中的表达及作用机制

摘要：

目的 探讨膜联蛋白A2(ANXA2)在小鼠视网膜新生血管形成过程中的表达及作用机制.方法 实验研究.将C57BL/6J小鼠分为4组:正常组(80只)、氧诱导视网膜病变(OIR)空白对照组(80只)、OIR阴性干扰组(50只)和OIR阳性干扰组(50只).采用视网膜铺片法对比观察氧诱导视网膜新生血管形态学变化.实时荧光(real-time)PCR法检测正常组和OIR空白对照组12～30日龄小鼠视网膜组织中ANXA2 mRNA的表达变化.取4组中17日龄小鼠视网膜行视网膜铺片.应用real-time PCR法及免疫印迹法检测4组17日龄小鼠视网膜组织中ANXA2、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9和组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的mRNA和蛋白表达情况.应用单因素方差分析对4组结果进行比较,进一步的两两比较采用SNK-q检验.结果 4组17日龄小鼠视网膜铺片结果发现,与正常组相比,OIR空白对照组视网膜新生血管迂曲、扩张,分布紊乱,渗漏严重,血管分层不清,大量异常交通支.ANXA2基因干扰后,OIR阳性干扰组视网膜新生血管迂曲现象减轻,血管渗漏较少,微血管瘤及新生血管芽数量减少,视网膜层次较明显,新生血管的危害减轻.不同日龄小鼠视网膜中ANXA2基因表达水平与新生血管生长密切相关,呈现出视网膜血管发育旺盛期高表达,而血管发育停滞期低表达的趋势.real-time PCR法检测结果显示,4组小鼠视网膜中ANXA2、VEGF-α、MMP-2、MMP-9和TIMP-2的mRNA表达水平的差异均有统计学意义(F=8.122～74.009,P值均＜0.05).进一步两两比较结果显示,OIR空白对照组的VEGF-α(0.22±0.04)、MMP-2(11.08±1.28)、MMP-9(4.64±0.38)的基因表达水平较正常组(0.16±0.02、2.18±1.39、1.17±0.25)显著上调(SNK-q检验:P值均＜0.01),而OIR阳性干扰组的VEGF-α(0.02±0.01)、MMP-2(2.21±0.42)、MMP-9(1.33±0.10)的基因表达水平较OIR空白对照组下调(SNK-q检验:P值均＜0.01)；OIR空白对照组的TIMP-2基因表达水平(0.59±0.15)较正常组(1.35±0.01)下调(SNK-q检验:P＜0.05),而OIR阳性干扰组TIMP-2的基因表达水平(1.19±0.16)较OIR空白对照组上调(SNK-q检验:P＜0.05).免疫印迹法在蛋白水平的检测得到类似结果.结论 ANXA2在诱导小鼠视网膜新生血管生成时高表达,可调节新生血管相关因子的表达,影响视网膜新生血管的形态学变化.基因干扰技术能成功抑制ANXA2基因的表达,ANXA2有望成为防治视网膜新生血管新的靶点.

关键词：视网膜新生血管化、膜联蛋白A2、血管内皮生长因子A、基质金属蛋白酶类

所属期刊栏目：49

分类号：R774.1;R363;R54

资助基金：山东省自然科学基金ZR2011HM012

在线出版日期：2013-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：642-648