辛伐他汀对糖尿病大鼠骨髓内皮祖细胞数量和功能的影响

摘要：

目的 观察不同浓度辛伐他汀对体外培养的糖尿病大鼠内皮祖细胞(EPC)数量和功能的影响.方法 实验研究.雄性成年Wistar大鼠20只,通过腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型.建模后第12周脱颈处死大鼠,提取大鼠股骨和胫骨骨髓,利用密度梯度离心方法分离单核细胞进行培养.将培养的细胞随机分为正常对照组和干预组,正常对照组用EGM-2培养液培养,干预组分别在EGM-2培养液中加入0.01、0.1、1、10 μmol/L的辛伐他汀进行培养.培养后7d,利用Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白和异硫氰酸荧光素标记的荆豆凝集素-1共同染色方法鉴定EPC,同时利用CD34和CD133共同标记法,以流式细胞仪鉴定EPC.倒置相差显微镜下计数EPC克隆形成单位,采用MTT比色法、Transwell小室和黏附能力测定实验观察EPC的增殖、迁移和黏附能力.摘除大鼠眼球行HE染色和视网膜病理组织学检查.组间骨髓EPC数量、增殖、迁移及黏附能力的比较采用单因素方差分析,组间各指标的多重比较采用LSD-t检验.结果 EPC集落计数结果显示,干预组EPC集落数量”(16.5±1.6)、(19.0±2.3)、(21.9±2.0)、(13.9±2.4)个/200倍视野”较正常对照组”(14.0±2.4)个/200倍视野”增加(F =20.493,P ＜0.01).EPC增殖实验、迁移实验及黏附实验结果显示,干预组EPC增殖能力(0.11 ±0.01、0.13±0.02、0.20±0.04、0.07±0.01)较正常对照组(0.07±0.01)提高(F=46.849,P＜0.01)；干预组EPC迁移能力”(10.5±1.6)、(12.9±2.2)、(15.9±2.4)、(9.4±1.4)个/200倍视野”较正常对照组”(8.9±1.2)个细胞/200倍视野”提高(F=20.442,P＜0.01)；干预组EPC的黏附能力”(10.6±1.9)、(15.1±2.7)、(19.0±3.9)、(7.9±1.2)个/200倍视野”较正常对照组”(7.5±1.2)个/200倍视野”提高(F=33.013,P＜0.01).光镜下观察可见,糖尿病大鼠视网膜厚度变薄,细胞排列紊乱,部分血管扩张,有向外突出、破溃的趋势.透射电镜下观察可见,毛细血管内皮细胞水肿,线粒体肿胀,毛细血管基底膜增厚,管腔狭窄和闭塞.结论 较低浓度辛伐他汀可呈剂量依赖性提高体外培养的糖尿病大鼠骨髓EPC数量,增强EPC黏附、迁移和增殖功能.

关键词：糖尿病视网膜病变、内皮细胞、干细胞、辛伐他汀、细胞,培养的

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资助基金：天津市应用基础及前沿技术研究计划10JCZDJC20300

在线出版日期：2013-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1015-1020