抑制整合素连接激酶表达水平对视网膜母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响

摘要：

目的 探讨抑制整合素连接激酶(ILK)基因表达水平对视网膜母细胞瘤细胞株HXO -Rb44增殖和凋亡的影响.方法 实验研究.通过脂质体转染法将ILK小干扰RNA( siRNA)转入HXO-Rb44细胞.实验分为4组:ILK siRNA干预组、阴性对照siRNA组、空脂质体组、空白对照组.RT-PCR法和免疫印迹法分别检测转染后48 h ILK mRNA和蛋白的表达水平；CCK-8法检测转染后48 h的细胞增殖抑制率；Annexin V/PI免疫荧光双染色法和流式细胞仪检测细胞凋亡情况.各组资料总体比较采用单因素方差分析.结果 采用脂质体转染法化学合成的ILK siRNA可以成功转染HXO-Rb44细胞.RT-PCR法检测结果显示,ILK siRNA干预组(0.12 ±0.02) ILK mRNA表达水平明显降低,与阴性对照siRNA组(0.45±0.05)、空脂质体组(0.42±0.04)和空白对照组(0.40±0.04)相比,差异有统计学意义(F=12.781,P=0.000).免疫印迹法检测结果显示,与空白对照组(0.38±0.07)、空脂质体组(0.40±0.05)及阴性siRNA对照组(0.43±0.03)相比,ILK siRNA干预组(0.10±0.03)的ILK蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(F=18.647,P=0.000).与空白对照组(0％)、空脂质体组(1.8％)及阴性siRNA对照组(2.1％)比较,ILK siRNA干预组(35.0％)的细胞增殖抑制率明显增高(F =23.573,P=0.000).Annexin V/PI免疫荧光双染色法和流式细胞仪检测结果显示,ILK siRNA干预组Annexin V阳性细胞明显增多,阳性率为26.5％,高于阴性对照siRNA组(5.3％)、空脂质体组(5.0％)、空白对照组(4.6％) (F=65.217,P=0.000).结论 siRNA可抑制HXO-Rb44细胞中ILK mRNA和蛋白的表达水平,抑制HXO-Rb44细胞增殖,并诱导其凋亡.

关键词：视网膜母细胞瘤、蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶、RNA、小分子干扰、细胞增殖、细胞凋亡

所属期刊栏目：48

分类号：R77(眼科学)

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：159-163