原子力显微镜观测小分子化合物J2对大鼠角膜移植术后内皮细胞膜表面的影响

摘要：

目的 探讨应用原子力显微镜(AFM)观察大鼠角膜移植术后的内皮细胞,观测小分子J2化合物对角膜内皮细胞超微结构的影响.方法 队列研究方法.将30只取右眼行穿透性角膜移植术后的实验大鼠编号后计算机随机抽号分为2组,每组15只.A组为J2药实验组,B组为安慰剂对照组.每组于术后第5、10、15、20、25天,分别计算机选号随机取下3只大鼠的角膜植片,经苏木素-咿红染色及AFM样品固定.两组AFM观测数据平均粗糙度(Ra)、平均峰值高度(Rp)、平均低谷高度(Rv)采用单因素方差分析.结果 A组植片平均存活时间为(33.12±6.80)d,B组为(18.87±4.19)d,两组比较差异有统计学意义(F=47.7449,P=0.000).AFM观测发现两组样品在植片存活第5天均显示为较规则的六边形结构,直径约15μm,可见细胞表面的凹凸不平结构.随着时间延长,两组样品出现不同改变,术后第20天:B组样品的细胞结构无法辨认,凹凸不平的表面分辨困难,而A组的细胞仍然保持结构清晰.Ra、Rp和Rv在同期比较中,两组结果存在差异有统计学意义.术后第5天,A组:Ra(97.64±31.58)nm,Rp(297.79±25.19)nm,Rv(545.55±25.83)nm;B组:Ra(112.61±34.29)nm,Rp(265.06±24.17)nm,Rv(544.41±21.78)nm(Fa=30.9416,P=0.0000;Fp=263.6018,P=0.0000;Pv=1.2013,P=0.2735).术后第10天,A组:Ra(102.98±32.98)nm,Rp(711.38±21.94)nm,Rv(639.89±22.58)nm;B组:Ra(222.85±31.28)nm,Rp(111.22±20.35)nm,Rv(746.49±23.17)nm(Fa=2086.4535,P=0.0000;Fp=53768.4676,P=0.0000;Pv=3257.3178,P=0.0000).术后第15天,A组:Ra(87.44±34.97)nm,Rp(344.18±21.09)nm,Rv(482.61±22.27)am;B组:Ra(197.64±35.72)nm,Rp(510.76±24.98)nm,Rv(545.62±23.17)nm(Fa=1458.1057,P=0.0000;Fp=7788.6963,P=0.0000;Pv=1153.2860,P=0.0000).术后第20天,A组:Ra(85.85±32.53)nm,Rp(348.69±21.26)nm,Rv(367.65±23.12)nm;B组:Ra(201.36±34.12)nm,Rp(788.58±20.34)am,Rv(563.33±21.01)nm(Fa=1801.1215,P=0.0000;Fp=67 057.9516,P=0.0000;Pv=11 770.2195,P=0.0000).术后第25天,A组:Ra(104.97±32.47)nm,Rp(395.05±20.38)nm,Rv(396.17±21.59)nm;B组:Ra(43.85±31.28)nm,Rp(249.88±20.79)nm,Rv(154.88±22.37)nm(Fa=551.4134,P=0.0000;Fp=7458.9255,P=0.0000;Pv=18 070.5189,P=0.0000).结论 角膜移植术后,A、B两组的角膜内皮细胞应用AFM观测可发现在Ra、Rp及Rv比较上存在差异,小分子化合物J2可延迟角膜移植发生排斥反应的时间.

关键词：显微镜检查、原子力、角膜移植、移植物排斥、免疫抑制剂、内皮细胞

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分类号：R779.65(眼科学)

资助基金：国家自然科学基金30973245;30471855

在线出版日期：2011-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：404-409