脂多糖诱导炎症反应对甲状腺相关眼病眼眶前脂肪细胞分化的影响

摘要：

目的 观察脂多糖诱导炎症反应对甲状腺相关眼病( TAO)眼眶前脂肪细胞分化的影响，探讨TAO眼眶脂肪增殖的发病机制。方法 实验研究。眼眶组织取TAO行开眶减压术的患者。将体外培养的TAO眼眶成纤维细胞，分为A组与B组，A组采用1 mg/L的脂多糖作用8h，然后常规用诱导分化液Ⅰ和Ⅱ诱导直至分化结束，B组仅用诱导分化液Ⅰ和Ⅱ诱导至分化结束。采用油红O染色法测定分化后脂肪细胞相对含量，逆转录聚合酶链反应法与Western blot法检测环氧化酶2( COX2)与过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ) mRNA与蛋白的表达，酶联免疫吸附实验检测上清液中前列腺素E2( PG E2)的表达。两样本均数比较采用t检验，多样本比较采用单因素方差分析，两两比较采用SNK检验。结果 分化后油红O染色显示两组细胞形态上无明显差异。A组细胞吸光度(A)值(1.02±0.08)较B组(0.74±0.06)明显升高，差异具有统计学意义(t=8.502，P=0.000)。A组细胞分化后PPARγ mRNA( 1.74±0.19)与蛋白(0.47 ±0.04)的表达分别较分化前PPARγ mRNA(0.30±0.07)与蛋白(0.08±0.02)的表达明显增强(P＜0.05)；B组细胞分化后PPARγ mRNA(1.15 ±0.18)与蛋白(0.35±0.03)的表达分别较分化前PPARγ mRNA(0.13 ±0.04)与蛋白(0.03 ±0.01)的表达明显增强(P＜0.05)；A组细胞分化后COX2 mRNA (0.28±0.07)与蛋白(0.24±0.03)的表达分别较分化前COX2 mRNA( 1.54 ±0.10)与蛋白(0.49±0.03)的表达明显减弱(P＜0.05)；B组细胞分化后COX2 mRNA的表达（0.08±0.03）较分化前(0.19±0.07)明显减弱(P＜0.05)，而COX2蛋白的表达(0.01±0.01)与分化前(0.03±0.01)比较差异无统计学意义(P＞0.05)。分化后A组细胞上清液中PGE2分泌水平(208.43±15.06)ng/L较分化前(898.75±21.09)ng/L显著降低(P＜0.05)；分化后B组细胞上清液中PGE2分泌水平(30.61±5.75) ng/L与分化前（35.75±4.09）ng/L比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。诱导分化前A组细胞COX2 mRNA与蛋白的表达及PGE2的分泌较B组明显增强(P＜0.05)，而PPARγ mRNA与蛋白的表达亦强于B组(P＜0.05)，分化后A组细胞COX2及PPARγmRNA与蛋白的表达、PGE2的分泌均强于B组(P＜0.05)。结论 脂多糖可诱导TAO眼眶前脂肪细胞产生炎症反应，使其炎症标志物COX2及其控制合成的PGE2表达增强，并使脂肪生成关键转录因子PPARγ表达上调，分化后PPARγ表达显著增强，而COX2与PGE2的表达明显降低。

关键词：脂多糖类、Graves眼病、环氧化酶2、PPARγ、细胞分化

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分类号：R622.9(整形外科学（修复外科学）)

资助基金：湖南省科技厅基金2008JT3002

在线出版日期：2011-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：156-161