人眼玻璃体切除液体外组织细胞培养技术的建立

摘要：

目的 建立玻璃体切除液组织和细胞培养的新技术.方法 实验研究.采用随机数字表法,选取30例孔源性视网膜脱离(RRD)和48例增生性糖尿病视网膜病变(PDR)患者,经睫状体平坦部玻璃体切除术后获得的玻璃体切除液标本,行0.5%荧光素钠反相标记玻璃体凝胶,经105U/L透明质酸酶和106U/L胶原酶Ⅰ联合消化,取沉淀混悬液接种于预置的0.01%多聚赖氨酸培养瓶中,倒置法培养24 h后,置入含30%胎牛血清的F12培养液中正置培养6 d,期间半量换液1次,动态观察增生膜片边缘细胞生长情况.结果 在0.01%多聚赖氨酸预置条件下,玻璃体切除液中的膜组织块经倒置培养24 h后均可半干燥贴壁,78例玻璃体切除液标本按上法贴壁,成功率100%.7d培养期间均未出现细菌、真菌及支原体污染.经0.5%荧光素钠标记,透明质酸酶联合胶原酶Ⅰ作用30 min,78例标本中玻璃体凝胶均被消化,消化率100%.部分增生膜边缘可见细胞迁移而出,呈现不同程度的生长和增生趋势.30例RRD标本中,细胞生长率43.33%(13/30);48例PDR标本中,细胞生长率37.50%(18/40),其中24例PDR-V标本中,细胞生长率41.67%(10/24).结论 酶解联合倒置半干燥细胞培养法可确保增生膜贴壁,短期培养既可避免污染,又可观察增生膜组织内细胞生长特性;该方法可用于增生膜细胞增殖活性的判断,有望成为一种预测增生性眼底疾病术后复发风险的新技术.

关键词：玻璃体、细胞培养技术、细胞增殖

所属期刊栏目：44

分类号：R77(眼科学)

在线出版日期：2009-02-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1112-1117