脂褐质荧光基团N-亚视黄基-N-视黄基乙醇胺在人视网膜色素上皮细胞蓝光损伤中的作用研究

摘要：

目的 探讨成人视网膜色素上皮(hRPE)细胞对脂褐质荧光基团N-亚视黄基-N-视黄基乙醇胺(A2E)的摄取及A2E在hRPE细胞蓝光损伤中的作用.方法 全反式视黄醛和乙醇胺混合,体外合成A2E.体外培养hRPE细胞.将A2E加入hRPE细胞培养液中,使A2E的浓度分别为25、50、100 μmol/L.观察hRPE细胞对A2E的摄取.用蓝光(450 nm)照射hRPE细胞20 min,光照强度70 mW/mm2,CCK-8检测细胞活力,Hoechst 33342荧光素染色、流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果 全反式视黄醛(100.0 mg)和乙醇胺(9.5 mg)混合后生成53.8 mg的A2E.吞噬A2E的hRPE细胞中能够检测到自发荧光,主要分布在细胞核周围.蓝光照射后,含有A2E的hRPE细胞活力下降,下降程度随A2E浓度增加而增强.不含A2E的hRPE细胞,经蓝光照射后,细胞活力未见明显下降.蓝光照射含有A2E的hRPE细胞,细胞核中出现浓染的碎块状荧光,流式细胞仪检测可见凋亡细胞特有的亚二倍体峰,加入25 μmol/L的A2E,光照后12、24、36及48 h,细胞凋亡率分别为(12.11±2.32)%、(31.21±3.72)%、(64.23±3.53)%及(58.71±3.48)%.仅接受光照不加入A2E、不接受光照(加入或不加入A2E)的hRPE细胞凋亡率在光照后各时间点的平均值均小于5%.结论 在hRPE细胞蓝光损伤的过程中,单独的光照射不会造成明显的细胞损伤或凋亡,A2E的存在是蓝光损伤的因素之一.提示在老年人中,含有较多脂褐质的hRPE细胞容易受到蓝光损伤.

关键词：色素上皮、眼、荧光、维生素A酸类、细胞凋亡

所属期刊栏目：43

分类号：R77(眼科学)

在线出版日期：2007-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1017-1021