10.3760/j:issn:0412-4081.2005.12.005
RNA干扰技术抑制体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞增殖的初步研究
目的探讨RNA干扰技术对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞增殖的抑制作用.方法采用化学合成的靶向IKK-β的siRNA,转染体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞,同时以对任何基因均无作用的siRNA作为阴性对照.以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测IKK-β mRNA表达水平,免疫印迹法检测IKK-β蛋白表达水平.将siRNA的转染浓度分别设为5、10、25、50、100、200 nmol/L,进行转染,于转染后48 h采用四甲基偶氮唑盐法检测其转染后对成纤维细胞的抑制作用.结果经转染了靶向IKK-β的siRNA,其成纤维细胞IKK-β的mRNA和蛋白表达水平均受到抑制.各个转染浓度(5、10、25、50、100、200 nmol/L)均可抑制成纤维细胞的增殖(P<0.05),抑制率分别为10.72%、23.35%、30.84%、51.25%、50.06%、49.63%,50 nmol/L时已达最大抑制率.结论靶向IKK-β的siRNA转染可以降低IKK-β的表达水平,同时对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞的增殖具有抑制作用.抗IKK-β的RNA干扰技术可能是抑制抗青光眼术后滤过道瘢痕化的新手段.
RNA干扰、蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶、筋膜、成纤维细胞、细胞分裂、青光眼
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R77(眼科学)
卫生部临床学科重点项目3030902005;广东省高校自然科学基金04Z001
2006-03-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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