10.3760/j:issn:0412-4081.2004.08.007
碱性成纤维细胞生长因子反义寡核苷酸及其脂质体对体外培养的大鼠晶状体上皮细胞增殖的抑制作用
目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)反义寡核苷酸及其脂质体对大鼠晶状体上皮细胞(LEC)增殖的抑制作用.方法体外培养大鼠LEC,细胞传代后分别加入bFGF反义和正义寡核苷酸及其脂质体,以营养液和无药脂质体为对照培养24 h后,用噻唑蓝(MTT)法测定细胞的增殖情况,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定细胞bFGF mRNA的表达情况.结果大鼠LEC原代培养24h可见细胞生长,形态为多边形,培养2~3周细胞汇合成片;传代培养细胞可在1~2周汇合成片.MTT法测定显示,bFGF反义寡核苷酸组(Ⅰ组)、正义寡核苷酸组(Ⅱ组)及营养液组(V组)的吸光度(A值)分别为0.138±0.074、0.325±0.097及0.370±0.079,Ⅰ组A值显著小于Ⅱ和V组(P=0.024,0.005);bFGF反义寡核苷酸脂质体组(Ⅲ组)、正义寡核苷酸脂质体组(Ⅳ组)及无药脂质体组(Ⅵ组)的A值分别为0.128±O.032、0.238±0.120及0.348±0.017,Ⅲ组A值显著小于Ⅵ组(P=0.000).RT-PCR法检测结果显示,以2μg总RNA为模板,循环30次,bFGF反义寡核苷酸、bFGF正义寡核苷酸及营养液的扩增产物的量分别为0.33、0.99及0.85μg;bFGF反义寡核苷酸脂质体、bFGF正义寡核苷酸脂质体及无药脂质体的扩增产物的量分别为O.23、0.48及0.56μg.结论大鼠LEC可在体外培养;bFGF反义寡核苷酸及其脂质体可减少bFGF的mRNA含量,并抑制体外培养的大鼠LEC增殖.(中华眼科杂志,2004,40:528-532)
大鼠、晶体、上皮细胞、成纤维细胞生长因子2、寡核苷酸类、反义、脂质体
40
R73;R96
北京市自然科学基金7982010
2004-10-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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528-532