腺病毒介导酸性成纤维生长因子对兔角膜内皮细胞感染及促增殖作用的实验研究

摘要：

目的观察复制缺陷型重组腺病毒载体介导酸性成纤维生长因子(aFGF)对体外培养的兔角膜内皮细胞(RCEC)的感染效率和促增殖作用.方法 293A细胞扩增复制缺陷型重组腺病毒,选用细胞半数感染剂量(TCID50)法测定病毒滴度.体外培养RCEC,用携带报告基因(LacZ)的重组腺病毒(Ad-LacZ)感染RCEC,二甲基甲酰胺(X-gal)染色估计瞬时感染效率,将含aFGF的重组腺病毒(Ad-aFGF)感染RCEC,RT-PCR 、Western blot分别检测aFGF转录及蛋白质表达情况,噻唑盐(MTT)法检测转基因细胞增殖情况.结果病毒滴度为2×108 pfu/ml;重组腺病毒感染RCEC 24 h后即可检测到外源基因表达,当感染倍数(MOI)值等于20时,Ad-LacZ对RCEC的感染效率为100%,感染Ad-aFGF对RCEC增殖有促进作用(F=217.107,P<0.05).结论复制缺陷型重组腺病毒载体介导的外源基因在RCEC中可有效表达,感染Ad-aFGF对RCEC增殖具有促进作用.(中华眼科杂志,2004,40:156-159)

关键词：腺病毒科、成纤维生长因子1、基因治疗、内皮、角膜、细胞培养

所属期刊栏目：40

分类号：R77(眼科学)

资助基金：上海市卫生系统"百人计划"057

在线出版日期：2004-04-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：156-159