增殖细胞核抗原反义寡核苷酸对牛晶状体上皮细胞增殖的影响

摘要：

目的探讨增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)反义寡核苷酸对牛晶状体上皮细胞增殖的影响.方法取体外培养的第2代牛晶状体上皮细胞用于实验.A～F组分别加入PBS、30 μmol/L PCNA 反义寡核苷酸、30 μmol/L PCNA 正义寡核苷酸、10 μg/L 碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、10 μg/L bFGF及30 μmol/L反义寡核苷酸、10 μg/L bFGF及30 μmol/L正义寡核苷酸;常规培养24 h后,使用流式细胞仪检测细胞周期的变化和PCNA蛋白的含量.提取细胞mRNA,采用地高辛标记PCNA探针和Northen酶联吸附免疫杂交法,在酶标仪上测定吸光度(A值)以表达PCNA mRNA含量.结果牛晶状体上皮细胞S期的细胞数量占细胞总数的百分比A组为(15.7±1.8)%,B组为(7.9±0.4)%,两组比较差异有非常显著意义(P<0.01); PCNA mRNA含量A组A值为 0.206±0.004, B组A值为0.173±0.014,两组比较差异有显著意义(P <0.05);PCNA蛋白表达率A组为(55.27±2.64)%,B组为(12.32±1.82)%,两组比较差异有非常显著意义(P<0.01).牛晶状体上皮细胞S期的细胞数量占细胞总数的百分比D组为(23.4±2.8)%, E组为(19.9±2.3)%,两组比较差异有显著意义(P<0.05); PCNA mRNA含量D组A值为0.576 ±0.021, E组A值为0.357±0.083,两组比较差异有非常显著意义(P<0.01);PCNA蛋白表达率D组为(76.40±0.43)%,E组为(35.58±4.04)%,两组比较差异有非常显著意义(P<0.01).结论 PCNA反义寡核苷酸可影响牛晶状体上皮细胞内PCNA mRNA含量,使PCNA蛋白表达率下降;可改变牛晶状体上皮细胞的周期,使S期细胞数量减少,达到抑制细胞增殖的作用.

关键词：增殖细胞核抗原、寡核苷酸类、反义、上皮细胞、细胞分裂、晶体、牛

所属期刊栏目：39

分类号：R77(眼科学)

资助基金：福建省自然科学基金C9810033

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：98-101