血红素加氧酶-1在纳米氧化锌致人脐静脉血管内皮细胞氧化应激损伤中的作用

摘要：

目的 探讨血红素加氧酶(HO-1)对纳米氧化锌(ZnO-NPs)致人脐静脉血管内皮细胞株(EA.hy926细胞)活性氧水平改变的影响.方法 取对数生长期EA.hy926细胞,分别采用0.0、2.5、5.0、10.0和15.0 mg/L ZnO-NPs溶液进行染毒,4 h后采用流式细胞仪检测细胞内活性氧水平,计算平均荧光强度(MFI),24 h后采用Western Blot检测细胞内HO-1蛋白表达水平.将15.0 mg/L浓度的ZnO-NPs溶液刺激细胞设定为ZnO-NPs组,同时设定空白对照组.另外使用终浓度为10 μmol/L的HO-1抑制剂锌原卟啉(ZnPPIx)及HO-1激活剂钴原卟啉(CoPPIx)分别预处理细胞,设置为ZnPPIX、CoPPIx组.以终浓度为10 μmol/L的ZnPPIX、CoPPIx预处理EA.hy926细胞1 h后,于培养基中加入15.0 mg/L ZnO-NPs进行培养,分别设定为ZnPPIX+ZnO-NPs组、CoPPIx+ZnO-NPs组.各组均于染毒后4 h后检测活性氧水平,计算平均荧光强度(MFI),24 h后检测HO-1表达水平.结果 ZnO-NPs染毒剂量增加,EA.hy926细胞内活性氧与HO-1水平增加(0.0、2.5、5.0、10.0和15.0 mg/L ZnO-NPs染毒组的MFI分别为22 627.22 ± 718.27、24 726.47 ± 568.52、31 141.75 ± 1 312.24、39 824.82 ± 4 774.74、50 569.03 ± 1 497.63,HO-1相对表达量分别为0.16±0.01、0.19±0.02、0.16±0.01、0.23±0.02、0.92±0.06),P值均<0.001.15.0 mg/L ZnO-NPs组HO-1灰度值高于ZnPPIx+ZnO-NPs组(1.12±0.01比1.05±0.05,P<0.05),且活性氧MFI水平较低(53 654.53±2 229.01比62 683.95±2 589.59,P<0.001);CoPPIx+ZnO-NPs组HO-1灰度值高于15.0 mg/L ZnO-NPs组(1.74±0.11比0.22±0.03,P<0.001),且活性氧水平较低(32 845.04± 993.48比53 654.53±2 229.01,P<0.001).结论 ZnO-NPs可致EA.hy926细胞发生氧化应激,呈剂量-效应关系,HO-1可调控ZnO-NPs诱发的氧化应激水平.

关键词：血红素加氧酶-1、细胞、活性氧、纳米氧化锌

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资助基金：郑州大学优秀青年教师发展基金1521329034 Outstanding Young Talent Research Fund of Zhengzhou University 1521329034

在线出版日期：2018-12-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1177-1181