10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2016.03.015
Toll样受体7在肠道病毒71型感染人Jurkat T细胞诱导炎症因子中的作用
目的:研究Toll样受体(TLRs)在肠道病毒71型(EV-A71)感染人T细胞中的表达情况,阐明其在EV-A71致炎症反应机制中的作用。方法 EV-A71毒株由深圳市CDC于2014年从手足口病患儿粪便中分离,接种200μl病毒滴度为103细胞培养半数感染量(CCID50)/ml的病毒液于人Jurkat T细胞,不同感染时间后,采用RT-PCR方法检测TLR1~TLR10 mRNA表达情况;采用Real-time PCR分析TLR7 mRNA变化水平;采用Western blot分析TLR7相关接头分子髓样分化因子(MyD88)表达水平;采用ELISA检测培养上清细胞因子白细胞介素(IL)-6、IL-8和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌水平。结果 Real-time PCR检测结果显示,感染6、12、24和48 h ,感染组TLR7 mRNA的相对表达水平分别为1.26±0.15、1.75±0.20、2.26±0.23和3.74±0.62,与对照组差异有统计学意义(t值分别为-2.96、-6.38、-9.57、-7.71,P值均<0.05);Western blot结果显示,感染24 h和48 h时,感染组MyD88蛋白表达水平与对照组相比分别增加1.34和2.17倍;细胞因子检测结果显示,感染24 h和48 h时,IL-6的分泌水平分别为(302.86±38.11)、(179.70±14.50)pg/ml,高于对照组24 h和48 h的分泌水平[(176.42±9.60)、(179.70±14.50)pg/ml],差异有统计学意义(t值分别为-5.57、-18.54,P值均<0.05)。48 h感染组TNF-α分泌水平为(100.81±9.81)pg/ml ,高于对照组[(56.19±6.94)pg/ml],差异有统计学意义(t=-6.43,P=0.003)。结论EV-A71主要通过TLR7被免疫活性细胞识别,进而激活TLR7相关信号通路,诱导产生大量促炎因子来参与感染致炎症反应的病理过程。
肠道病毒71型、Toll样受体、人Jurkat T细胞、细胞因子
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R39;R73
深圳市科技计划项目201302169;深圳市宝安区科技计划项目2013089;深圳市战略性新兴产业发展专项资金项JCYJ20120615085419420
2016-05-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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