三种定量方法在温泉水中军团菌连续性监测中的应用

摘要：

目的 比较传统的平板培养法、荧光定量PCR和荧光染料叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide,EMA)结合荧光定量PCR的方法(EMA-荧光定量PCR)对温泉水中军团菌的检测效果.方法 于2011年每月(除5月份)对北京市某温泉度假村的5个温泉池进行采样,每月采集11份水样,全年共采集121份.分别采用传统的平板培养法、荧光定量PCR和EMA-荧光定量PCR方法对水样中军团菌进行定性和定量分析.结果 平板培养法、荧光定量PCR和EMA-荧光定量PCR检测温泉水中军团菌污染率分别为74.4％ (90/121)、100.0％(121/121)和100.0％(121/121)；3种方法对121份温泉水样本中军团菌定量数值分别为0.10 ～ 216.00菌落形成单位(CFU)/ml、1.47～1557.75基因单位(GU)/ml和0.20～301.69 GU/ml.荧光定量PCR、EMA-荧光定量PCR和平板培养方法对121份温泉水每份军团菌含量检测的中位数(第25百分位数～第75百分位数)分别为75.30 (32.51 ～ 192.10) GU/ml、36.46(16.08 ～91.21) GU/ml和5.30 (0.00 ～ 33.70) CFU/ml.对于121份温泉水水样,3种方法对军团菌含量分析的定量数值差异有统计学意义(x2=187.900,P＜0.01),其中荧光定量PCR的定量数值最高,EMA-荧光定量PCR的数值次之,平板培养的数值最低.结论 荧光定量PCR和EMA-荧光定量PCR方法检测温泉水中军团菌的灵敏度优于传统的培养方法,EMA-荧光定量PCR方法适合用于环境水体中军团菌活菌监测.

关键词：军团菌、长滩、温泉、聚合酶链反应、荧光染料

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分类号：S852.65;R730.2;R378

资助基金：中国疾病预防控制中心青年基金;传染病预防控制国家重点实验室面上项目

在线出版日期：2013-08-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：637-640