丹酰氯柱前衍生化-高效液相色谱法测定单胺类神经递质及其代谢物

摘要：

目的 建立丹酰氯柱前衍生化-高效液相色谱法测定单胺类神经递质及其代谢产物的实验方法.方法 采用C18色谱柱(150 mm×4.6mm×5 μm)并以丹酰氯(10 mg/ml)为衍生试剂,在水浴50℃,缓冲液pH11时进行柱前衍生反应,20μl醋酸丙酮溶液(1.0mol/L.)被加入以终止反应,冷却至室温,进样,采用0.1 mol/L的醋酸锌乙腈四氢呋喃溶液,以体积比为62∶ 35∶3为流动相,在0～ 10 min时流速为1.0 ml/min,10 ～ 35 min时流速为2 0ml/min进行洗脱,紫外检测波长286 nm.采用上述方法分别测试了单胺类神经递质及其代谢物,并对方法的检测限、精准度和准确度进行评价.结果 在1～20 μg/ml范围内,各组分线性关系良好(r=0.999).去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺及其代谢产物3-甲氧-4-羟苯乙二醇、高香草酸、5-羟吲哚乙酸最低检出限分别为0.60、0.80、0.41、0.21、0.19、0.1 ug/ml,各待测物质的平均回收率为78.5％～95.9％,RSD分别为6.62％、7.64％、2.98％、3.60％、5.09％、3.09％.在色谱条件的选择和优化过程中,观察到金属离子对分离的重要作用.并对衍生反应的温度、缓冲液pH及丹酰氯用量进行了探讨.在上述条件下衍生反应完全,各待测物质基线分离.结论 建立了丹酰氯柱前衍生化-高教液相色谱法测定单胺类神经递质及其代谢产物的实验方法.

关键词：色谱法、液相、神经递质、丹酰氯、柱前衍生化

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分类号：R285.5;TS2;O657.7

资助基金：湖南省教育厅项目;湖南省重点学科建设项目

在线出版日期：2013-02-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1117-1120