几种细胞毒性评价方法在纳米氧化铝神经细胞毒性研究中的应用比较

摘要：

目的 以微米氧化铝、纳米碳做对照,通过不同的细胞活力检测方法 观察纳米氧化铝对神经细胞活力的影响.方法 体外原代培养小鼠神经细胞,将纳米氧化铝、微米氧化铝、纳米碳均按正常对照组、62.5 μmol/L、125.0 μmol/L、250.0μmoL/L、500.0 μmol/L、1.0 mmol/L、2.0 mmol/L共7个剂量组分别染毒神经细胞,用细胞计数试剂(CCK-8)、噻唑蓝(MTT)及乳酸脱氢酶试剂(LDH)等方法 检测细胞活力[570 nm波长处的吸光度值(A570值)]的变化.结果 (1)CCK-8法检测结果 显示,250.0 μmol/L～2.0 mmol/L纳米氧化铝染毒组细胞活力(A570值分别为0.878±0.009、0.823±0.016、0.647±0.008、0.594 ±0.013)小于微米氧化铝染毒组(A570值分别为0.960±0.008、0.951±0.036、0.833 ±0.008、0.708±0.012)和纳米碳染毒组(A570值分别为0.977±0.003、0.973±0.002、0.924±0.006、0.891±0.023),差异具有统计学意义(同剂量组纳米氧化铝与微米氧化铝比较,t值分别为-0.082、-0.128、-0.186、-0.114,P值均<0.01;与纳米碳比较,t值分别为-0.099、-0.150、-0.277、-0.297,P值均<0.01).(2)MTT法检测结果 显示,在500.0 μmol/L、1.0 mmol/L剂量下,纳米氧化铝染毒组细胞活力(A570值分别为0.648±0.095、0.575±0.061)小于微米氧化铝染毒组(A570值分别为0.830±0.044、0.816±0.014)和纳米碳染毒组(A570值分别为0.889±0.009、0.765±0.049),差异具有统计学意义(同剂量组纳米氧化铝与微米氧化铝比较,t值分别为-0.183、-0.242,P值均<0.01;与纳米碳比较,t值分别为-0.241、-0.190,P值均<0.01).(3)LDH法检测的结果 显示,纳米氧化铝染毒组在125.0 μmol/L～2.0 mmol/L剂量下的细胞LDH释放量(A570值分别为1.862±0.102、1.905±0.066、1.930±0.037、1.946±0.033、1.967±0.068)高于纳米碳染毒组(A570值分别为1.484±0.110、1.559 ±0.039、1.663±0.014、1.732±0.076、1.765 ±0.073),差异具有统计学意义(t值分别为-0.377、0.346、0.266、0.213、0.202,P值均<0.01);在125.0 μmol/L～1.0 mmol/L剂量下的LDH释放量高于微米氧化铝染毒组(A570值分别为1.578±0.011、1.639±0.025、1.727±0.024、1.808±0.020),差异具有统计学意义(t值分别为0.284、0.266、0.202、0.172,P值均<0.01).结论 纳米氧化铝对神经细胞活力的影响比微米氧化铝和纳米碳大;LDH方法 比CCK-8和MTT法更加适合检测纳米物质作用后的细胞活力变化.

关键词：氧化铝、纳米结构、碳、细胞增殖

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分类号：R1(预防医学、卫生学)

资助基金：国家自然科学基金30740032;30972456;山西省自然科学基金2009011054-1

在线出版日期：2010-10-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：785-789