实时荧光定量PCR模板DNA快速制备的方法建立与应用

摘要：

@@ 实时荧光定量PCR技术于1996年美国AppiedBiosystems公司推出,由于该技术不仅实现PCR从定性到定最的飞跃,而且与常规PCR相比,具有特异性更强、敏感度更高、操作简便快速、可以有效解决常规PCR污染问题等优点[1-2],已广泛应用于突发公共卫生事件应急处置中病原体的检测.提高实时荧光定量PCR的检测速度,服务于突发公共卫生事件应急检测是当前备受关注的技术问题.实时荧光定量PCR由模板制备和PCR两部分组成,缩短模板制备时间就可提高实时荧光定量PCR的检测速度.我们研制了一种模板制备方法,使制备时间从原来的30 min以上缩短至5 min以内,制备效果与经典的煮沸裂解法和先进的柱式核酸提取试剂盒相同,用于实时荧光定量PCR可在15～30 min内完成病原体DNA检测.

机标关键词：实时荧光定量、PCR技术、模板制备、DNA检测、快速制备、制备方法、突发公共卫生事件、检测速度、技术问题、病原体、min、有效解决、应急检测、应急处置、污染问题、时间、核酸提取、特异性、试剂盒、敏感度

所属期刊栏目：43

分类号：R4(临床医学)

资助基金：浙江省科技厅项目2008c32035;浙江省卫生厅科研资助项目20007A199

在线出版日期：2009-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：248-250