顺铂对A549细胞DNA损伤修复生物标记物表达的影响

摘要：

目的研究顺铂对肺癌A549细胞中切除修复鼠缺陷交叉互补基因2(ERCC2)蛋白、尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)、细胞增殖核抗原(PCNA)在肺癌和食管癌组织中表达水平的影响.方法通过彗星试验、RT-PCR和蛋白印记法研究3种生物标记物在顺铂处理和未处理A549细胞之间的表达水平.分为染毒前、染毒12 h、染毒24 h、停止染毒12 h、停止染毒24 h 5个不同时间段组,每组细胞数均为1×106个/ml.结果在低浓度顺铂(IC20剂量)作用下,染毒24 h内DNA损伤程度的变化与作用时间成正比,染毒12 h、24 h尾相(单位:mm)分别为5.02 ±0.68和7.22±0.53,与阴性对照的尾相2.73±0.29比较有明显差异 .停止染毒24 h尾相为3.64±0.70,与阴性对照比较无明显差异.ERCC2、UDG和PCNA的mRNA水平和蛋白质水平在细胞染毒后均明显升高,染毒24 h后mRNA水平分别为0.71±0.08、0.74±0.06和0.82±0.09,均明显高于阴性对照(分别为0.28±0.05、0.31±0.05和0.37±0.06);蛋白质表达水平分别为4.37±0.57、5.47±0.46和2.21±0.47,均明显高于阴性对照(分别为2.21±0.47、2.54±0.38和3.21±0.47).停止染毒后3种酶的mRNA分别为0.31±0.08、0.33±0.05和0.43±0.05,与阴性对照比较无明显差异;蛋白质水平分别为2.80±0.35、3.03±0.57和3.57±0.67,与阴性对照无明显差异.在停止染毒后24 h mRNA水平均逐渐恢复正常.蛋白质的改变则比mRNA缓慢.结论 DNA损伤对ERCC2、UDG和PCNA有快速正性调节作用,首先促进mRNA表达水平的增加,然后促进蛋白水平的增加.但这种调节作用时间不长,停止染毒后短时间内可恢复到染毒前水平.

关键词：DNA损伤、肿瘤标记、生物学、肺肿瘤、肿瘤细胞、培养的、顺铂

所属期刊栏目：37

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金39990570

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：109-111