miR-191抑制视网膜血管内皮细胞增生和血管形成

摘要：

目的:观察慢病毒（LV）介导miR-191对体外培养的人视网膜血管内皮细胞（hREC）增生和血管生成的抑制作用。方法:体外培养hREC细胞系，分为对照组、缺氧组、LV-空载体（LV-vector）组、LV-miR-191 （LV-191）组。LV-vector组、LV-191组分别转入相应的慢病毒载体。采用流式细胞仪检测细胞转染率；细胞计数试剂盒-8 （CCK-8）实验检测细胞增生能力；划痕实验和侵袭小室（Transwell）实验检测细胞迁移能力；Matrigel实验检测细胞管腔形成能力；实时定量聚合酶链反应（qPCR）检测miR-191相对表达量及其下游靶基因p21、血管内皮生长因子（VEGF）、细胞分裂蛋白激酶（CDK）6、细胞周期蛋白-D1 (Cyclin D1）mRNA相对表达量。两两比较采用独立样本
t检验。
结果:流式细胞仪检测结果显示，对照组、LV-191组细胞转染率分别为0.615%、99.400%。CCK-8、细胞划痕、Transwell细胞迁移、Matrigel实验结果显示，与对照组比较，缺氧组、LV-vector组细胞增生数量明显增多（
t=6.130、4.606 ）、细胞迁移率明显增高（
t=4.910、6.702 ）、微孔膜上染色的细胞数量明显增多（
t=7.244、6.724 ）、细胞管腔形成能力增强（
t=8.345、9.859），LV-191组细胞增生数量明显减少（
t=14.710）、细胞迁移率明显降低（
t=6.245 ），微孔膜上染色的细胞数量明显减少（
t=5.333）、细胞管腔形成能力明显减弱（
t=5.892 ），差异均有统计学意义（
P≤0.01）。qPCR检测结果显示，与对照组、LV-vector组比较，LV-191组细胞中miR-191 mRNA相对表达量明显上调（
t=44.110、42.680），Cyclin D1 （
t=29.940、14.010）、CDK6 （
t=15.200、7.645）mRNA相对表达量明显下降，差异均有统计学意义（
P<0.01）；p21 mRNA相对表达量增高，但差异无统计学意义（
t=2.013、2.755，
P>0.05）。4组细胞中VEGF mRNA相对表达量比较，差异无统计学意义（
F=0.966，
P>0.05 ）。
结论:miR-191可通过上调p21 mRNA表达，下调CDK6、Cyclin D1 mRNA表达，抑制hREC增生、迁移及管腔形成。

关键词：微RNAs、内皮，血管、转染、增生

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资助基金：天津市教委科研计划项目2017KJ215;天津市视网膜功能与疾病重点实验室自主与开放课题2020tjswmm003;The Science and Technology Development Fund of Tianjin Education Commission for Higher Education2017KJ215;Open Project of Tianjin Key Laboratory of Retinal Functions and Diseases2020tjswmm003

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：49-55