基于丝裂原活化蛋白激酶信号通路灯盏细辛对大鼠急性高眼压的缓解及视网膜神经节细胞的保护作用

摘要：

目的:观察灯盏细辛（EBHM）调控丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路对大鼠急性高眼压的影响及视网膜神经节细胞（RGC）的保护作用。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠60只，采用随机数字表法分为对照组、模型组、EBHM低剂量组（A组）、EBHM中剂量组（B组）、EBHM高剂量组（C组），每组均为12只；以左眼为实验眼。模型组、A组、B组、C组大鼠通过前房加压灌注生理盐水构建急性高眼压模型；对照组仅给予全身麻醉。建模后2~ 30 d，对照组、模型组大鼠灌胃生理盐水3 ml，1次／d；A组、B组、C组大鼠分别给予0.30、0.45、0.60 g/100 g EBHM灌胃，1次／d。建模前以及建模后1、14、30 d测量大鼠眼压，并统计高眼压模型比例。建模后30 d，苏木精-伊红（HE）染色观察视网膜组织病理变化；免疫荧光染色检测RGC数量变化；实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测各组大鼠视网膜中p38MAPK、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 （Caspase-3）mRNA相对表达量；蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测各组大鼠视网膜中p38MAPK、磷酸化p38MAPK （p-p38MAPK）、Caspase-3蛋白相对表达量。多样本间比较采用单因素方差分析；两两样本间比较采用
SNK-q检验。
结果:建模后1 d，对照组大鼠均未出现急性高眼压，其余各组均建模成功。与模型组比较，B组、C组建模后14 d急性高眼压率较低，差异有统计学意义（
χ2=98.701，
P<0.05）；A组、B组、C组建模后30 d急性高眼压率均为0。A组、B组、C组建模后14、30 d之间急性高眼压率比较，差异均无统计学意义（
P>0.05）。HE染色结果显示，对照组大鼠视网膜结构完整，各层清晰可见；RGC计数未见异常，形态饱满圆润。模型组大鼠视网膜明显变薄；RGC数量大量减少，形态空泡化，排列稀疏。A组、B组、C组大鼠视网膜变厚，RGC数量增多，其中C组视网膜结构恢复程度更好。免疫荧光染色结果显示，A组、B组、C组大鼠RGC计数较模型组升高，差异有统计学意义（
F=297.514，
P<0.05 ）；组间两两比较，A组低于B组、C组（
q=2.842、5.263），B组低于C组（
q=2.457 ），差异均有统计学意义（
P<0.05 ）。RT-qPCR、Western blot检测结果显示，与模型组比较，A组、B组、C组大鼠视网膜中Caspase-3 mRNA （
F=267.912）、蛋白（
F=692.279）相对表达量及p-p38MAPK蛋白相对表达量（
F=150.061）均降低，差异均有统计学意义（
P<0.05 ）。组间两两比较，C组大鼠视网膜中Caspase-3 mRNA （
q=6.977、15.642 ）、蛋白（
q=6.997、15.642）相对表达量及p-p38MAPK蛋白（
q=12.443、24.358）相对表达量低于A组、B组，B组低于A组（
q=11.678、12.471、10.204），差异均有统计学意义（
P<0.05 ）。
结论:EBHM可以显著降低急性高眼压模型大鼠眼压，提高RGC计数，减轻视网膜损伤；其调控机制可能与MAPK通路有关。

关键词：灯盏细辛、高眼压、p38丝裂原活化蛋白激酶类、视网膜神经节细胞

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资助基金：河南省医学科技攻关计划项目2018020799;河南省高等学校重点科研项目19A320076;National Programs for Science and Technology Development of Henan Province2018020799;The University Key Scientific Research Project of Henan Province19A320076

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：455-461