Krüppel样因子7对视网膜缺血再灌注损伤小鼠视网膜神经节细胞存活及视网膜电图的影响

摘要：

目的:观察Krüppel样因子7 （KLF7）对视网膜缺血再灌注（RIR）损伤小鼠RGC存活及ERG的影响。方法:采用随机数字表法将126只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组、RIR组、正常-KLF7组、正常-绿色荧光蛋白（GFP）组、RIR-KLF7组、RIR-GFP组。小鼠8周龄时，正常-KLF7组及RIR-KLF7组小鼠玻璃体腔注射1.0×10
12 vg/ml过表达KLF7的重组腺相关病毒载体（AAV2-KLF7-GFP）1 μl；正常-GFP组及RIR-GFP组小鼠玻璃体腔注射同样滴度的仅带GFP的空白腺相关病毒载体1 μl。小鼠11周龄时，RIR组、RIR-KLF7组、RIR-GFP组小鼠建立RIR模型并测量眼压。玻璃体腔注射AAV2-KLF7-GFP病毒载体4周后，利用视网膜冰冻切片观察病毒转染情况。RIR建模后第7天，利用视网膜铺片免疫荧光染色定量观察RGC存活率；行全视野ERG检查，观察其暗适应a、b波和振荡电位（Ops ）、光负性反应（PhNR）振幅和潜伏期的变化；行视动反应检测，观察其视敏度的变化。玻璃体腔注射病毒4周后，采用Western bolt检测小鼠视网膜中KLF7的蛋白表达。
结果:与正常组比较，RIR组小鼠视网膜RGC存活率，ERG a、b波振幅，Ops、PhNR振幅以及视敏度均明显降低，差异有统计学意义（
t=12.860、7.157、5.735、8.953、4.744、9.887，
P<0.05 ）。随着刺激光强的增加，小鼠暗适应ERG a、b波振幅逐渐升高，其潜伏期逐渐缩短。与RIR组比较，RIR-KLF7组小鼠视网膜RGC存活率，ERG a、b波振幅，Ops、PhNR振幅以及视敏度均明显升高，差异有统计学意义（
t=6.350、3.253、3.695、5.825、5.325、4.591，
P<0.05）。Western bolt检测结果显示，正常-KLF7组小鼠视网膜中KLF7蛋白表达较正常组明显上调，差异有统计学意义（
t=4.105，
P<0.01 ）。
结论:KLF7过表达可提高RGC存活率，保护其电生理功能。

关键词：Kruppel样转录因子类、再灌注损伤、视网膜神经节细胞、视网膜电描记术、动物实验

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资助基金：国家自然科学基金面上项目81271025;中央高校基本科研业务费专项资金资助（青年教师资助项目）2042020kf0065;湖北省自然科学基金面上项目（青年）2020CFB240;National Natural Science Foundation of China81271025;Special Fund for Basic Scientific Research Operating Expenses of Central Colleges and Universities Subsidy Project for Young Teachers2042020kf0065;General Project of Natural Science Foundation of Hubei Province Youth2020CFB240

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：846-852