普罗布考对高糖培养人视网膜Müller细胞特化蛋白1/细胞骨架相关蛋白/核因子E2相关因子2/半胱氨酸连接酶催化亚基表达的影响

摘要：

目的 观察普罗布考对高糖环境下人视网膜Müller细胞中特化蛋白1(SP1)/细胞骨架相关蛋白(Keap1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)表达的影响;初步探讨普罗布考的抗氧化作用.方法 体外培养的人Müller胞分为正常糖组(5.5 mmol/L)、高糖组(25.0 mmol/L)、正常糖+普罗布考组、高糖+普罗布考组;后两组中加入100 μmol/L普罗布考.免疫荧光染色法鉴定Müller细胞;免疫荧光染色法和实时RP-PCR(qRT-PCR)检测各组Müller细胞中SP1、Keapl、Nrf2、GCLC蛋白、mRNA的表达.两组间数据比较采用独立样本t检验.结果 体外培养的人Müller细胞谷氨酰胺合成酶染色阳性率＞95％.免疫荧光染色结果显示,Müller细胞中SP1、Keap1、Nrf2、GCLC蛋白均呈阳性表达.qRT-PCR结果显示,与正常糖组比较,高糖组Müller细胞中SP1(t=28.30,P＜0.000)、Keap1(t=5.369,P=0.006)、Nrf2(t=10.59,P=0.001)mRNA表达显著上调,GCLC显著下调(t=4.633,P=0.010),差异均有统计学意义.与高糖组比较,高糖+普罗布考组Müller细胞中SP1(t=12.60,P=0.000)、Keap1(t=4.076,P=0.015)mRNA表达显著下调,Nrf2(t=12.90,P=0.000)、GCLC(t=15.96,P＜0.000)mRNA表达显著上调,差异均有统计学意义.结论 普罗布考通过抑制高糖诱导Müller细胞中SP1、Keapl的表达,上调Müller细胞中Nrf2、GCLC的表达,发挥抗氧化作用.

关键词：普罗布考/治疗应用、Sp1转录因子、NF-E2相关因子2、谷氨酸-半胱氨酸连接酶、Müller细胞、细胞骨架相关蛋白

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资助基金：湖南省自然科学基金2018JJ2001;湖南省卫计委科研计划课题项目C2015-69;爱尔眼科医院集团科技基金AF1601D5Hunan Natural Science Foundation Project2018JJ2001;Hunan Health and Family Planning Commission Research projectC2015-69;Aier Ophthalmic Hospital Group Science and Technology Fund ProjectAF1601D5

在线出版日期：2019-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：187-191