人脐带间充质干细胞对高糖环境中恒河猴视网膜血管内皮细胞的免疫调节作用

摘要：

目的 观察人脐带间充质干细胞(hUCMSC)对高糖培养的恒河猴视网膜血管内皮细胞(RF/6A细胞)的免疫调节作用.方法 利用复合培养体系将hUCMSC加入Transwell系统上层小室,下室加入含有25 mmol/L的葡萄糖及RF/6A细胞;将hUCMSC按照1:1比例与RF/6A细胞共培养.实验分为对照组、高糖组及hUCMSC与高糖共培养组进行,3组RF/6A细胞分别采用Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM)/F12完全培养液、DMEM/25 mmol/L D-葡萄糖完全培养液、hUCMSC与25 mmol/LD-葡萄糖完全培养液进行培养.采用噻唑蓝比色法检测共培养后RF/6A细胞的增生活力;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RF/6A细胞中叉头蛋白(Foxp3)的相对表达量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中白细胞介素(IL)-17的浓度.结果 培养后第1天,对照组、高糖组及hUCMSC与高糖共培养组RF/6A细胞存活率比较,差异无统计学意义(F=0.030,P＞0.05).培养后第3、7天,高糖组RF/6A细胞存活率较对照组明显降低,差异有统计学意义(t=36.072、27.890,P＜0.05);hUCMSC与高糖共培养组RF/6A细胞存活率较高糖组明显提高,差异有统计学意义(t=13.280、19.650,P＜0.05).Western blot检测结果显示,培养后第7天,高糖组RF/6A细胞中Foxp3蛋白相对表达量较对照组明显下降,差异有统计学意义(t=7.826,P＜0.05);hUCMSC与高糖共培养组RF/6A细胞中Foxp3蛋白相对表达量较高糖组明显提高,差异有统计学意义(t=19.936,P＜0.05).ELISA检测结果显示,培养后第7天,高糖组、hUCMSC与高糖共培养组细胞培养上清液中IL-17浓度较对照组明显升高,差异有统计学意义(F=1 267.503,P＜0.05).hUCMSC与高糖共培养组细胞培养上清液中IL-17浓度较高糖组明显下降,差异有统计学意义(t=17.386,P＜0.05).结论 hUCMSC能提高被高糖抑制的RF/6A细胞增生活力,可通过调控Foxp3、IL-17表达来平衡修复RF/6A细胞.

关键词：间质干细胞、内皮细胞/免疫学、免疫调节、动物实验

所属期刊栏目：32

分类号：R774(眼科学)

在线出版日期：2016-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：611-614