轴突导向因子netrin-1对早期糖尿病大鼠血视网膜屏障的影响

摘要：

目的 观察探讨外源性轴突导向因子netrin-1对早期糖尿病(DM)大鼠血视网膜屏障(BRB)的影响及可能的作用机制.方法 健康雄性Sprague-Dawley大鼠80只,采用随机数字表法将其分为正常对照组、DM+平衡盐溶液(BSS)组、DM+ netrin-1低剂量组、DM+ netrin-1高剂量组,每组均为20只大鼠.链脲佐菌素腹腔注射诱导DM模型.DM 3个月时,DM+netrin-1低剂量组、DM+ netrin-1高剂量组大鼠玻璃体腔分别注射10、100 mg/ml的netrin-1 5μl;DM+BSS组大鼠玻璃体腔注射等体积BSS.高糖高脂饲养1个月后处死所有大鼠,摘除眼球.每组随机选取5只大鼠行苏木精-伊红染色观察各组大鼠视网膜微血管改变;免疫组织化学染色检测视网膜闭合蛋白(occludin)的表达以及荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)观察occludin mRNA的表达;伊凡思蓝(EB)渗漏试验观察大鼠视网膜微血管结构改变和渗漏.独立样本t检验对两组间指标进行统计学分析.多组间比较采用单因素方差分析.结果 光学显微镜观察发现,DM+ BSS组大鼠视网膜神经节细胞层水肿,排列紊乱,视网膜微血管扩张,结构异常;DM+ netrin-1高剂量组大鼠视网膜神经节细胞水肿减轻,微血管扩张程度减轻.免疫组织化学染色结果显示,DM+netrin-l低剂量组、DM+netrin-1高剂量组大鼠视网膜棕黄色颗粒染色范围扩大,颜色加深.RT-PCR检测结果显示,与正常对照组大鼠视网膜中occludin mRNA表达比较,其余各组大鼠视网膜中occludinmRNA表达减少,差异有统计学意义(P＜0.05).DM+ BSS组、DM+ netrin-1低剂量组、DM+ netrin-1高剂量组间大鼠视网膜平均积分吸光度”A,旧称光密度(OD)”值(IA值)比较,差异有统计学意义(F=177.13,P=0.00),且DM+ netrin-1高剂量组大鼠视网膜occludin表达较DM+ netrin-1低剂量组高.DM+ BSS组大鼠视网膜IA值与DM+ netrin-1低剂量组比较,差异有统计学意义(t=-13.98,P=0.00);DM+ netrin-1高剂量组大鼠视网膜IA值与正常对照组比较,差异有统计学意义(t=12.87,P=0.00).EB渗漏试验结果显示,DM+ BSS组、DM+ netrin-1低剂量、DM+ netrin-1高剂量组间大鼠视网膜EB渗漏量比较,差异有统计意义(F=179.69,P=0.00);DM+ netrin-1低剂量组大鼠视网膜EB渗漏量与DM+netrin-1高剂量组比较,差异有统计学意义(t=12.73,P=0.00).结论 玻璃体腔注射外源性netrin-1对早期DM大鼠BRB有保护作用;这种保护作用可能是通过抑制视网膜occludin的减少实现.

关键词：糖尿病视网膜病变/病理生理学、血视网膜屏障/病理生理学、神经生长因子类、动物实验

所属期刊栏目：31

分类号：R744.1(神经病学与精神病学)

资助基金：山东省自然科学基金ZR2010HM062

在线出版日期：2015-10-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：472-476