腺病毒介导Tum5重组基因对高糖刺激下恒河猴视网膜血管内皮细胞增生、迁移及管腔形成的影响

摘要：

目的 观察腺病毒介导Tum5重组基因对高糖刺激下恒河猴视网膜血管内皮细胞(RF/6A细胞)增生、迁移及管腔形成的影响.方法 构建空载体病毒rAd-绿色荧光蛋白(GFP)和携带Tum5基因的重组腺病毒表达载体(rAd-Tum5).分别感染RF/6A细胞,流式细胞仪检测感染效率.细胞感染48 h后,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Tum5重组基因体外表达.将RF/6A细胞分为正常对照组、高糖刺激对照组(HG组),空载体对照组(HG+ rAd-GFP组),Tum5基因组(HG+ rAd-Tum5组).采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、侵袭小室(Transwell)实验及基质胶(Matrigel)实验分析Tum5重组基因对高糖刺激下RF/6A细胞增生、迁移及管腔形成的影响.结果 流式细胞仪检测结果显示,rAd-GFP、rAd-Tum5感染细胞的效率分别为55.13％、50.31％.Western blot检测结果显示,HG+ rAd-Tum5组在相对分子质量14×103左右处可见Tum5蛋白表达条带;正常对照组、HG组、HG+ rAd-GFP组均未见Tum5蛋白表达条带.CCK-8、Transwell实验及Matrigel实验结果显示,正常组、HG组、HG+ rAd-GFP组、HG+ rAd-Tum5组4组间细胞增生数量、迁移数量及成形管腔数量比较,差异均有统计学意义(F=44.484、772.666、137.696,P＜0.05).组间细胞增生数量、迁移数量及成形管腔数量两两比较结果显示,HG组较正常对照组增加,差异有统计学意义(P＜0.05);HG组与HG+rAd-Tum5组之间无明显差异(P＞0.05);HG+rAd-Tum5组较HG组、HG+ rAd-GFP组明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 腺病毒介导Tum5重组基因可抑制高糖刺激下RF/6A细胞的增生、迁移及管腔形成.

关键词：内皮细胞/病理学、细胞增殖/药物作用、细胞迁移抑制/药物作用、基因转移技术、转染、动物实验

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分类号：R774.1(眼科学)

资助基金：高等学校博士学科点专项科研基金20111202110009;天津市高等学校科技发展基金计划项目20120128;教育部博士点基金20121202120005;教育部留学回国基金第45批

在线出版日期：2015-10-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：467-471