热休克蛋白47在增生性玻璃体视网膜病变增生膜组织的表达以及转化生长子因2-β对视网膜色素上皮细胞中热休克蛋白47表达的影响

摘要：

目的：观察热休克蛋白(HSP)47在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增生膜中的表达及转化生长因子(TGF)-β2对视网膜色素上皮(RPE)细胞 HSP47表达的影响。方法收集行玻璃体切割手术的PVR 患者增生膜病理标本,苏木精-伊红、Masson 及免疫组织化学染色,观察其组织病理特征及 HSP47的表达。加入浓度分别为0、1、5、10 ng/ml 的 TGF-β2刺激培养人 RPE(ARPE-19)细胞,并根据此浓度此分为4组；浓度为5 ng/ml TGF-β2刺激细胞0、12、24、48 h。荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内 HSP47、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)的 mRNA 和蛋白表达情况。结果光学显微镜观察发现,PVR 增生膜中可见类圆形上皮样细胞及色素颗粒,大量胶原蛋白成分；HSP47在多数上皮样细胞胞浆及间质内呈阳性表达。RT-PCR 检测结果显示,1、5、10 ng/ml 组细胞内 HSP47、Col-ⅠmRNA表达较0 ng/ml 组分别上调了1.32、2.35、1.85倍和1.29、1.52、2.11倍,差异均有统计学意义(HSP47：F =27.21,P <0.05；Col-Ⅰ：F =23.45,P <0.05)；TGF-β2作用0、12、24、48 h 后,细胞内 HSP47、Col-ⅠmRNA 表达较0 h 分别上调了1.56、1.84、2.86倍和1.57、1.86、2.78倍,差异均有统计学意义(HSP47：F =31.56,P <0.05；Col-Ⅰ：F =54.43,P <0.001)。Western blot 检测结果显示,1、5、10 ng/ml 组细胞内HSP47、Col-Ⅰ蛋白表达较0 ng/ml 组分别上调了2.33、2.89、2.60倍和1.18、1.49、2.11倍,差异均有统计学意义(HSP47：F =39.78,P <0.05；Col-Ⅰ：F =29.10,P <0.05)。TGF-β2作用12、24、48 h 后,细胞内HSP47、Col-Ⅰ蛋白表达量较0 h 分别上调了2.08、2.37、2.80倍和1.38、1.59、2.16倍,差异均有统计学意义(HSP47：F =49.18,P <0.05；Col-Ⅰ：F =42.52,P <0.05)。结论 HSP47在 PVR 增生膜中呈阳性表达,TGF-β2可能通过促进 ARPE-19细胞 HSP47的表达,增加 Col-Ⅰ的合成与沉积。

关键词：玻璃体视网膜病、增生性/病理生理学、视网膜色素上皮、HSP47 热休克蛋白质类、转化生长因子β2

分类号：R774.1(眼科学)

资助基金：山西省归国留学人员科研资助项目2013-132

在线出版日期：2015-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：377-381