脂质体介导的过氧化物酶增殖激活受体-γ共激活子-1α特异性小干扰RNA对小鼠视网膜新生血管的抑制作用

摘要：

目的 观察玻璃体腔注射脂质体介导的过氧化物酶增殖激活受体-γ共激活子-1α(PGC-1α)特异性小干扰RNA(siRNA)对小鼠视网膜新生血管的抑制作用.方法 80只C57BL/6J小鼠分为正常组、模型空白组、模型对照组和PGC-1α siRNA组,每组20只.正常组小鼠在正常空气中饲养.模型空白组、模型对照组和PGC-1α siRNA组小鼠建立氧诱导视网膜病变模型.小鼠12日龄时,模型对照组、PGC-1α siRNA组小鼠玻璃体腔分别注射阴性对照siRNA-脂质体复合物、PGC-1α siRNA-脂质体复合物1 μl;模型空白组小鼠不作处理.小鼠17日龄时,作视网膜铺片,荧光显微镜观察各组小鼠视网膜血管形态变化;作视网膜切片,光学显微镜下计数各组突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数;实时聚合酶链反应(PCR)检测各组小鼠视网膜中PGC-1α、血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠视网膜中PGC-1α、VEGF的蛋白表达.计算PGC-1α siRNA组PGC-1α、VEGF mRNA和蛋白表达的抑制效率.结果 荧光显微镜观察发现,正常组小鼠视网膜血管分布呈网状;模型空白组、模型对照组小鼠视网膜可见大片无灌注区及新生血管丛,伴荧光渗漏;PGC-1α siRNA组小鼠视网膜无灌注区及新生血管丛较模型空白组、模型对照组明显减少.光学显微镜观察发现,模型空白组、模型对照组突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数较正常组明显增多,差异有统计学意义(P＜0.05);PGC-1α siRNA组突破视网膜内界膜的血管内皮细胞数较模型空白组明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).实时PCR和Western blot检测结果显示,模型空白组、模型对照组小鼠视网膜中PGC-1α、VEGFmRNA和蛋白表达均较正常组明显上调,差异有统计学意义(P＜0.05);PGC-1α siRNA组小鼠视网膜中PGC-1α、VEGF mRNA和蛋白表达较模型空白组明显下调,差异有统计学意义(P＜0.05).PGC-1αsiRNA组PGC-1α、VEGF mRNA表达的抑制效率分别为54％、48％,蛋白表达的抑制效率分别为53％、40％.结论 玻璃体腔注射脂质体介导的PGC-1α siRNA能有效抑制小鼠视网膜新生血管的形成.

关键词：视网膜新生血管化/药物疗法、过氧化物酶体增殖物激活受体、RNA干扰、动物实验

所属期刊栏目：31

分类号：R774.1(眼科学)

资助基金：国家自然科学基金81000387

在线出版日期：2015-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：268-273