重组腺病毒-p21抑制猴视网膜微血管内皮细胞增生的作用研究

摘要：

目的 观察重组腺病毒-p21 (rAd-p21)对体外培养的猴视网膜微血管内皮细胞(RF/6A)增生的作用。方法 体外培养RF/6A细胞系，分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、rAd-p21转染组及阴性对照组，并转入相应的质粒表达载体。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法及蛋白免疫印迹(Western blot)检测p21mRNA及蛋白在RF/6A细胞中的表达；应用流式细胞仪检测p21基因对RF/6A细胞周期的影响；行内皮细胞体外成管实验观察p21基因对RF/6A细胞成管的抑制作用。结果 rAd-p21转染组p21 mRNA及蛋白表达显著增高。细胞周期检测结果显示，PBS组、rAd-p21转染组、阴性对照组G0/G1期细胞百分比分别为（40.76±6.66）％、（67.45±11.61）％、(41.55±8.99)％；rAd-p21转染组RF/6A细胞出现G0/G1期阻滞，G0/G1期细胞比例增多。rAd-p21转染组与PBS组和阴性对照组比较，差异有统计学意义(F=21.284，P=0.000)。体外成管实验显示，PBS组、rAd-p21转染组、阴性对照组每一视野下内皮细胞成管数分别为（8.25±3.19）、（3.86±1.21）、(7.62±2.69)个；rAd-p21转染组与PBS组和阴性对照组比较，差异有统计学意义(F=7.138，P=0.004)。结论 rAd-p21可成功转染RF/6A细胞并稳定表达p21 mRNA及蛋白，并可显著抑制其增生。

关键词：视网膜新生血管化/预防和控制、基因转移技术、转染、动物实验

所属期刊栏目：27

分类号：R774.1(眼科学)

在线出版日期：2011-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：462-465