腹腔渗出细胞辅助原代培养成年大鼠视网膜Müller细胞

摘要：

目的 观察以腹腔渗出细胞为饲养细胞对原代培养的成年大鼠视网膜Müller细胞生长状态的影响.方法 制备大鼠腹腔渗出细胞,CD68免疫组织化学染色鉴定巨噬细胞,墨汁吞噬实验检测吞噬活性.酶消化法原代培养成年大鼠视网膜Müller细胞,神经胶质酸性蛋白(GFAP)和波形蛋白免疫组织化学染色鉴定.饲养细胞加入Müller细胞进行共培养后,流式细胞术分析Müller细胞的生长周期,末端脱 氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口翻译法(TUNEL)染色检测凋亡情况. 结果大鼠腹腔渗出细胞中巨噬细胞占95%以上,对墨汁颗粒有良好的吞噬能力.原代培养的Müller细胞贴壁生长,胞体较大、扁平,第3代细胞生长减慢.加入饲养细胞后,Müller细胞生长增生加快,S期和G2/M期细胞增多(S期,t=4.172,P<0.001;G2/M期,t=3.562,P<0.01),第1代细胞生长时间由25～30 d缩短至18～22 d,第2代由10～15 d缩短至7～10 d;Müller细胞凋亡减少(t=3.804,P<0.01). 结论以腹腔渗出细胞为饲养细胞能促进Müller细胞的生长增生,抑制其凋亡,加快Müller细胞的培养速度,是原代培养成年大鼠视网膜Müiler细胞的一种有效方法.

关键词：巨噬细胞、细胞培养技术、流式细胞术、Müller细胞

所属期刊栏目：25

分类号：R774(眼科学)

资助基金：国家自然科学基金杰出青年科学基金30600694

在线出版日期：2009-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：206-209