缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子干扰性RNA对人血管内皮细胞血管内皮生长因子表达的抑制

摘要：

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)小片段干扰性RNA(siRNA)对人血管内皮细胞VEGF表达的影响.方法 构建HIF-1α siRNA重组质粒.将体外培养的人血管内皮细胞(HUVEC-12)分成常氧(20%)组和低氧(1%)组.低氧组中,采用脂质体LipofectamineTM2000(LF2000)分别转染空载体质粒(空载体组)、HIF-1α siRNA(HIF-1α组)、VEGF165siRNA(VEGF组)和HIF-1α siRNA+VEGF165 siRNA(共转染组).低氧组中未转染的细胞为对照组.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定基因转染效率;RT-PCR和免疫细胞化学法检测各组细胞中VEGF基因和蛋白表达的变化.结果 成功构建HIF-1α siRNA重组质粒.人血管内皮细胞转染24 h后,HIF-1α siRNA和VEGF165 siRNA重组质粒有表达.常氧组细胞中仅见微弱的VEGF mRNA和蛋白表达,而低氧组表达明显上调;HIF-1α组、VEGF组和共转染组表达较对照组减弱,其中共转染组抑制效果最明显.结论 HIF-1α和VEGF165siRNA能有效抑制人血管内皮细胞VEGF的表达.

关键词：缺氧诱导因子1、α亚基、血管内皮生长因子类、RNA干扰、内皮细胞

所属期刊栏目：23

分类号：R446;Q75(诊断学)

资助基金：国家自然科学基金030471853

在线出版日期：2008-01-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：422-425