miRNA-206介导BMSCs分化为软骨细胞及对骨关节炎模型的影响

摘要：

目的 探讨miRNA-206介导骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为软骨细胞及其在骨关节炎(OA)模型中的可能作用.方法 2017年1月至2018年7月,分离大鼠BMSCs,流式细胞术检测CD90、CD45,鉴定BMSCs的纯度.使用慢病毒载体将miRNA-206或miRNA-206抑制剂转染到BMSCs,地塞米松诱导14 d,阿利新蓝染色和II型胶原免疫染色检测成软骨分化的能力.MTT法检测BMSCs的增殖能力,Western blot检测成软骨细胞中标志蛋白Aggrecan、Col II、Sox9、Runx2的表达水平. RT-PCR检测成软骨细胞中标志基因Sox9 mR-NA的表达水平.在OA大鼠模型中尾静脉注射慢病毒载体转染 miRNA-206 或 miRNA-206 抑制剂,Western blot检测软骨形成的标志蛋白Aggrecan、Col II、Sox9、Runx2.结果 分离的 BMSCs 的纯度为(80.7±3.9)% ;miRNA-206 转染 BMSCs 可以促进细胞增殖能力, 增加其成软骨分化;Western blot结果表明miRNA-206转染组可以增加软骨细胞中标志性蛋白Aggrecan、Col II、Sox9的表达,下调Runx2的表达.同时RT-PCR结果表明miRNA-206上调BMSCs成软骨细胞标志基因Sox9 mRNA的表达.与OA组比较,miRNA-206可以增加软骨组织中信号蛋白Aggrecan、Col II、Sox9的表达(P＜0.05),下调 Runx2 的表达水平(P＜0.05). 结论 miRNA-206 可以正调控 BMSCs 分化为软骨细胞,增加细胞增殖能力,上调软骨标志蛋白Aggrecan、Col II、Sox9 的表达,下调Runx2,并可能增加OA大鼠模型中成软骨能力.

关键词：骨髓间充质干细胞、骨关节炎、成软骨分化、miRNA-206、大鼠

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资助基金：国家自然科学基金项目31660265,81060145,81560356;贵州省人民医院国家自然科学基金补助基金项目黔科合平台人才[2017]5724-5;贵州省人民医院青年基金项目GZSYQN[2015]06 Fund program: National Natural Science Foundation of China31660265, 81060145, 81560356;Guizhou Provincial People's Hospital National Natural Science Foundation Subsidy Fund ProjectGuizhou Science and Cooper-ation Platform Talents [2017]5724-5;Youth Fund Project of Guizhou Provincial People's HospitalGZSYQN[2015]06

在线出版日期：2019-11-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：467-472