外源性一氧化氮促进人脐静脉内皮细胞损伤修复的体外实验研究

摘要：

目的 观察外源性一氧化氮(NO)对体外培养的正常及损伤模型中的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的干预变化,并探讨其修复机制.方法 建立HUVEC的损伤模型,利用外源性NO供体硝普钠(SNP)进行干预.实验分为三组:正常HUVEC组(正常组);H2O2诱导HUVEC损伤模型组(损伤组);SNP干预H2O2诱导HUVEC损伤模型组(干预组).光镜观察细胞形态学变化、Hoechst33258蓝色荧光染色后观察凋亡小体;Western Blot法检测eNOS、Caspase-7蛋白表达水平;ELISA法检测VEGF水平及免疫组化法检测PCNA表达水平.结果 细胞形态及凋亡小体观察:正常HUVEC在H202诱导下发生氧化应激反应性损伤,细胞形态发生改变,出现凋亡小体;干预组细胞形态基本正常,凋亡小体明显减少.Western Blot法检测:损伤组eNOS表达水平降低,干预组eNOS表达回升,接近正常组含量;正常组未见Caspase-7蛋白表达,损伤组可检测到明显表达,干预组表达量显著减少.ELISA法检测:干预组VEGF含量高于正常组和损伤组,与损伤组比较差异有统计学意义(P＜0.05);免疫组化法检测:干预组PCNA表达[(9.87±0.75)％],与正常组[(10.25±0.63)％]比较差异无统计学意义(P＞0.05),与损伤组[(3.04±0.34)％]比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在一定剂量外源性NO干预下可提高内皮细胞中eNOS基因的自身合成,促进损伤内皮细胞形态的修复,抑制凋亡发生以及保护损伤内皮细胞的增殖、合成及分泌等重要功能.

关键词：一氧化氮、内皮细胞、损伤修复

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资助基金：山东省医药卫生科技发展计划项目2014WS0110Projects of Medical and Health Technology Development Program in Shandong Province 2014WS0110

在线出版日期：2018-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：108-113